多重耐药尿路致病性大肠杆菌中移动粘菌素耐药基因mcr-9的筛查研究

本研究针对印度本地临床分离的多重耐药尿路致病性大肠杆菌(UPEC)，通过PCR技术筛查移动粘菌素耐药基因mcr-9的流行情况。研究人员发现88株样本均未检出mcr-9基因且对粘菌素/多粘菌素B保持敏感，表明该地区尚未出现环境源mcr-9基因向临床菌株的水平转移，为抗生素管理策略提供了重要基线数据。

　　

抗生素耐药性已成为全球公共卫生的重大威胁，其中粘菌素(colistin)作为治疗极端耐药(XDR)革兰阴性菌的"最后防线"药物，其耐药性问题尤为严峻。近年来，动物饲料中粘菌素的滥用导致质粒介导的移动粘菌素耐药(mobile colistin resistance, mcr)基因在环境中广泛传播，目前已发现10个变体。特别值得警惕的是mcr-9基因，其独特的可诱导特性——在亚致死浓度粘菌素刺激下才表达耐药性，使得常规检测可能漏诊携带该基因的临床菌株。印度本地已有环境样本检出mcr-9的报道，这种"环境-临床"的基因水平转移风险亟待评估。

为此，Sri Balaji Vidyapeeth（被视为大学）下属Mahatma Gandhi医学教育与研究院的研究团队开展了一项针对性研究。他们从2023年9月至2024年7月期间收集了100例尿路感染患者的UPEC分离株，筛选出88株多重耐药(MDR)菌株进行重点分析。研究采用微量肉汤稀释法测定粘菌素/多粘菌素B最低抑菌浓度(MIC)，并通过特异性PCR引物筛查mcr-9基因。该研究成果发表在《BMC Research Notes》上，为区域耐药监测提供了重要数据。

研究主要采用三项关键技术：基于CLSI 2023标准的Kirby-Bauer纸片扩散法进行抗生素敏感性谱分析；微量肉汤稀释法精确测定粘菌素/多粘菌素B的MIC值；针对mcr-9基因特异的常规PCR检测（使用465bp扩增产物作为标记）。所有样本均来自三级医院的临床尿路感染病例，年龄跨度从8个月至95岁。

结果与讨论

1. 耐药谱特征：MDR菌株对头孢噻肟(cefotaxime)耐药率高达98%，诺氟沙星(norfloxacin)86%，复方新诺明(cotrimoxazole)78%，与印度医学研究委员会(ICMR)2023年监测报告趋势一致。值得注意的是，所有菌株对粘菌素/多粘菌素B保持完全敏感，对磷霉素(fosfomycin)和呋喃妥因(nitrofurantoin)的敏感率分别为91%和72%。

2. mcr-9基因筛查：PCR结果显示88株UPEC均未携带mcr-9基因（如图1所示）。这一阴性结果与印度喀拉拉邦生乳样本、泰米尔纳德邦家禽分离株中检出mcr-9的环境研究形成对比，提示目前该基因尚未突破物种屏障感染人类致病菌。

1. 流行病学意义：研究团队指出，阴性结果可能反映当地良好的抗生素管理实践，但也强调需扩大监测范围至其他肠杆菌科细菌。mcr-9的诱导表达特性使其可能隐匿传播，因此持续监测对早期发现耐药进化至关重要。

该研究首次系统评估了印度本地UPEC中mcr-9的流行状况，为WHO抗菌药物管理(AWAR