诃子提取物新诃子酸体外抗幽门螺杆菌活性及机制研究：靶向CagA蛋白与抑制细菌黏附的新发现

本研究针对幽门螺杆菌(HP)耐药性问题，从传统中药诃子(Terminalia chebula Retz)中分离鉴定新诃子酸(neochebulinic acid)，通过UPLC-MS/MS和NMR解析结构，采用MIC/MBC、SEM和分子对接等技术证实其通过抑制CagA蛋白表达和破坏细菌结构发挥选择性抗菌作用，为开发靶向HP疗法提供新思路。

　　

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, HP)感染是全球公共卫生难题，不仅导致胃炎、消化性溃疡，更是胃癌的I类致癌原。尽管抗生素疗法是当前主流方案，但耐药菌株的涌现使临床治疗陷入困境。传统中药诃子(Terminalia chebula Retz)在民间医学中早有抗感染应用记载，但其活性成分与作用机制始终未明。中山大学药学院(深圳)的研究团队在《BMC Complementary Medicine and Therapies》发表的研究，首次从诃子水提物中分离出新诃子酸(neochebulinic acid)，系统揭示了其靶向HP毒力因子的独特机制。

研究采用半制备液相色谱从诃子提取物中分离单体化合物，通过超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)和核磁共振(NMR)鉴定结构。针对5株HP标准菌株和临床分离株，采用微量肉汤稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)，扫描电镜(SEM)观察细菌形态变化，结合Western blot分析毒力蛋白表达，并运用AlphaFold2预测蛋白结构进行分子对接。

结果部分

1. 新诃子酸的结构鉴定
   通过质谱检测到m/z 973.1119的分子离子峰（图1），核磁共振数据（图S1）确认其为CAS 18913-60-5的新诃子酸，结构特征为4位酯化的鞣花单宁衍生物（图2）。

1. 抗菌活性评估
   对HP标准株ATCC 700392的MIC为32μg/mL，且MBC>256μg/mL显示其抑菌特性（表1）。SEM图像显示该浓度处理24小时后，细菌出现明显结构破损（图3），但CCK-8实验证实其对宿主细胞GES-1无毒性（图5A）。

1. 抗黏附与毒力抑制
   16-32μg/mL浓度可降低HP对宿主细胞68%的黏附率（图5C），Western blot显示CagA蛋白表达量下降40%（图6）。分子 docking预测其与CagA核心域结合能达-11.9 kcal/mol（图7），涉及GLN24、ASP335等53个残基的相互作用。

结论与意义
该研究首次阐明新诃子酸通过双重机制对抗HP感染：①直接破坏细菌结构完整性；②特异性靶向毒力因子CagA抑制其功能。相较于传统抗生素，这种源于中药的天然产物展现出独特优势——选择性抑制病原体而不干扰宿主细胞，为克服耐药性提供新策略。值得注意的是，与其同源化合物1,3,6-三没食子酰葡萄糖相比，新诃子酸虽结构损伤较弱，但表现出更强的抗黏附活性，提示4位取代基可能增强干预宿主-病原体相互作用的能力。未来研究需进一步验证其体内药效，并探索对铜死亡(cuproptosis)等新兴通路的影响，为开发抗HP创新药物奠定基础。