综述：精准狙击实体瘤的CAR-NK细胞疗法

这篇综述系统探讨了CAR-NK（嵌合抗原受体自然杀伤）细胞疗法在实体瘤治疗中的最新进展，重点分析了其相较于CAR-T（如CRS风险低、无GvHD）的独特优势，以及靶向设计（如GPC3、MSLN、HER2等）、制备挑战（如体外扩增、转导效率）和联合策略（如STING激动剂、PD-1抑制剂）。文章通过临床前和临床试验数据（如NCT03415100）验证了CAR-NK在胰腺癌、乳腺癌、胶质母细胞瘤等疾病中的潜力，同时指出TME（肿瘤微环境）抑制和抗原异质性等关键瓶颈。

　　

CAR-NK细胞疗法的崛起

近年来，CAR-T细胞疗法在血液肿瘤中取得突破，但其在实体瘤中的应用受限于TME屏障和毒副作用（如CRS）。CAR-NK细胞凭借天然杀伤机制、多源性（外周血、脐带血、iPSCs等）和安全性（低CRS风险），成为实体瘤治疗的新希望。

CAR-NK的设计与制备

CAR-NK的核心结构包括：

• 胞外域：scFv（如抗GPC3或MSLN）通过铰链区连接跨膜域；
• 胞内域：从一代（仅CD3ζ）到四代（整合IL-15等细胞因子），通过共刺激分子（如4-1BB、CD28）增强活性。NK-92细胞系和UCB-NK是常用来源，但体外扩增（如K562-mbIL21饲养细胞）和冷冻保存（DMSO-free方案）仍是挑战。

实体瘤中的应用突破

• 胰腺癌：PSCA-CAR-NK联合CD70靶向显著抑制Capan-1移植瘤；MSLN-CAR-NK与STING激动剂协同激活抗肿瘤免疫。
• 乳腺癌：HER2-CAR-NK在TNBC中通过H₂O₂酶缓解缺氧；TF-CAR-NK在临床前模型中显示高效细胞毒性。
• 胶质母细胞瘤：EGFRvIII-CAR-NK通过CXCR4增强浸润，临床试验（NCT03383978）证实颅内注射安全性。

挑战与创新策略

• TME抵抗：TGF-β抑制可通过基因编辑（如TGFβR2-KO）或纳米颗粒（MnOX）缓解；
• 抗原逃逸：双靶点（如CD19/CD22）或逻辑门控（SynNotch-CAR）提升特异性；
• 联合治疗：PD-1抑制剂逆转耗竭，PTT（光热疗法）改善NK细胞浸润。

未来方向

优化CAR结构（如DAP10共刺激）、开发通用型iPSC-NK平台，以及探索代谢重编程（如靶向腺苷通路），将推动CAR-NK从实验室迈向临床。