外泌体递送FER抑制剂通过调控AJUBA-Hippo轴抑制弥漫大B细胞淋巴瘤进展的创新研究

本研究针对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)治疗中FER酪氨酸激酶异常激活导致的化疗耐药问题，创新性地采用外泌体递送FER抑制剂E260，系统揭示了FER通过AJUBA-Hippo-YAP信号轴促进DLBCL进展的分子机制。研究发现外泌体-E260联合化疗可显著增强肿瘤抑制效果，同时证实循环外泌体FER可作为DLBCL诊断标志物，为DLBCL的精准诊疗提供了新策略。

弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)作为非霍奇金淋巴瘤(NHL)中最常见的侵袭性亚型，在中国占NHL病例的45.8%。尽管R-CHOP方案将5年生存率提升至60-70%，但仍有30-40%患者出现难治/复发，中位生存期仅10个月。这种严峻的临床现状亟需揭示DLBCL进展的分子机制并开发新型治疗策略。FER酪氨酸激酶作为Fes原癌基因家族成员，在多种恶性肿瘤中异常表达，但其在DLBCL中的调控机制尚不明确。

山东第一医科大学附属山东省立医院的研究团队在《npj Precision Oncology》发表的重要研究，首次系统阐明了FER在DLBCL中的致癌作用及分子机制，并创新性地开发了外泌体递送FER抑制剂E260的靶向治疗策略。研究通过多组学分析发现，FER-AJUBA-Hippo-YAP信号轴的异常激活是驱动DLBCL进展的关键机制，而循环外泌体FER可作为新型液体活检标志物。

研究采用的主要技术方法包括：TCGA和GTEx数据库的生物信息学分析；51例DLBCL患者样本的免疫组化检测；体外细胞功能实验（CCK8增殖、流式细胞凋亡检测）；OCI-LY3异种移植小鼠模型；外泌体分离鉴定（TEM、DLS、Western blot）；RNA-seq转录组测序；Co-IP蛋白互作验证等。

FER过表达与DLBCL进展相关
通过分析TCGA和GTEx数据发现，FER在DLBCL中显著高表达，且与不良预后相关。免疫组化证实FER蛋白在DLBCL组织中的表达水平显著高于反应性增生组织（p<0.01），ROC曲线显示FER区分DLBCL与健康人的AUC达0.78。临床相关性分析显示，FER阳性表达与Ann Arbor分期、LDH、Ki67、β₂-M和IPI评分等不良预后因素显著相关（p<0.05）。生存分析表明FER高表达患者中位OS仅7.28个月。

FER调控DLBCL细胞恶性表型
功能实验显示，敲低FER可显著抑制OCI-LY3和U2932细胞增殖（p<0.01），促进细胞凋亡（OCI-LY3：8.2% vs 4.1%），并增强对化疗药物敏感性；而过表达FER则产生相反效果。小鼠实验证实sh-FER组肿瘤生长显著受抑（p<0.001），Ki67表达降低。

外泌体-E260的制备与抗肿瘤效应
从DLBCL细胞分离的外泌体经鉴定具有典型杯状形态（30-150nm），表达Tsg101和CD9标志物。PKH26标记显示外泌体与DLBCL细胞结合效率在24h达峰值。体外实验表明，外泌体递送的E260（EXO-E260）较游离E260更能抑制细胞增殖（p<0.05），并诱导晚期凋亡/坏死（Annexin V/7AAD⁺细胞增加）。联合治疗实验中，EXO-E260使DLBCL细胞对阿霉素和伊布替尼的敏感性显著提高（p<0.01）。小鼠实验显示EXO-E260组肿瘤体积较PBS组减少62%（p<0.001）。

E260通过AJUBA-Hippo轴发挥作用
RNA-seq和KEGG分析揭示E260主要影响Hippo通路。机制研究发现：

1. E260处理使p-MOB1(Thr35)和p-YAP(Ser397)水平升高，促进YAP胞质滞留
2. Co-IP证实AJUBA通过SH2-PTK结构域与FER直接结合
3. 回补实验显示过表达AJUBA可逆转E260对p-YAP(Ser397)的调控作用
4. AJUBA在DLBCL患者中高表达且与FER呈正相关（r=0.83, p<0.001）

循环外泌体FER的诊断价值
DLBCL患者血浆外泌体FER mRNA水平显著高于健康对照（p<0.001），且治疗后明显下降。ROC分析显示外泌体FER联合LDH诊断DLBCL的AUC达0.93。外泌体FER水平与LDH、Ki67、IPI评分等临床参数显著相关（p<0.05）。

该研究首次系统阐明了FER-AJUBA-Hippo-YAP轴在DLBCL进展中的核心作用，创新性地建立了外泌体递送E260的靶向治疗策略。研究发现不仅为DLBCL提供了新的预后标志物和治疗靶点，还证实了外泌体在淋巴瘤诊疗中的双重价值——既可作为药物递送载体，又能作为液体活检标志物。特别是EXO-E260与化疗的协同效应，为克服DLBCL化疗耐药提供了新思路。研究提出的"外泌体递送-靶向治疗-液体监测"一体化策略，对推动DLBCL精准诊疗具有重要临床意义。