TOB1通过外泌体circ_0008719/miR-3615轴重编程抑制胃癌进展的分子机制研究

本研究揭示了TOB1过表达通过调控胃癌细胞外泌体中hsa_circ_0008719/miR-3615轴抑制肿瘤进展的新机制。哈尔滨医科大学附属第二医院科研中心团队发现，TOB1可上调外泌体circ_0008719并下调miR-3615表达，通过促进自噬(autophagy)和抑制增殖发挥抑癌作用，为胃癌治疗提供了新的潜在靶点。

　　

胃癌作为全球第五大常见恶性肿瘤，其治疗面临巨大挑战。尽管已有研究表明抑癌基因TOB1能通过诱导自噬抑制胃癌进展，但其具体分子机制仍不明确。近年来，外泌体（exosomes）作为细胞间通讯的重要载体备受关注，其中富含的环状RNA（circular RNAs, circRNAs）因其稳定性和调控功能成为研究热点。然而，TOB1如何通过外泌体circRNAs调控胃癌进展仍是一片未知领域。

哈尔滨医科大学附属第二医院科研中心的研究团队在《Scientific Reports》发表的研究填补了这一空白。研究人员发现TOB1过表达可重编程胃癌细胞外泌体中hsa_circ_0008719和miR-3615的表达谱。这项研究不仅揭示了circRNA-miRNA互作网络在胃癌中的调控作用，更首次证实了外泌体circ_0008719作为分子海绵吸附miR-3615促进自噬的抑癌机制。

研究采用RNA测序(RNA-seq)筛选差异表达的circRNAs和miRNAs，通过qRT-PCR验证临床组织表达差异，利用透射电镜(TEM)和纳米颗粒追踪分析(NTA)鉴定外泌体特性。建立TOB1过表达和敲除细胞模型，结合双荧光素酶报告基因实验验证circRNA-miRNA相互作用，并通过CCK-8、克隆形成和Western blot等功能实验评估生物学效应。

外泌体鉴定

研究首先通过差速离心法分离外泌体，TEM显示典型双层膜结构，NTA检测粒径约100nm，Western blot验证外泌体标志蛋白TSG101和CD9的表达。

差异表达谱分析
RNA-seq鉴定出TOB1过表达导致87个circRNAs上调和2个下调，其中12个为新型circRNAs。hsa_circ_0008719（源自AKT2基因内含子10）与自噬通路显著相关。GO/KEGG分析显示其宿主基因AKT2参与胃癌和自噬调控通路。

circRNA功能验证

Sanger测序证实hsa_circ_0008719的环化位点，RNase R实验显示其稳定性。核质分离实验表明其定位于胞质，双荧光素酶报告系统验证其与miR-3615的直接结合。临床样本检测显示hsa_circ_0008719在胃癌组织中显著低表达且与分化程度相关。

功能机制研究

过表达hsa_circ_0008719显著抑制胃癌细胞增殖并促进LC3-II/LC3-I转化，证实其通过外泌体递送发挥抑癌作用。机制上，TOB1通过上调circ_0008719吸附miR-3615，解除miR-3615对自噬通路的抑制，形成TOB1-circ_0008719-miR-3615调控轴。

这项研究创新性地揭示了外泌体circRNAs在TOB1抑癌机制中的关键作用，不仅为胃癌诊断提供了潜在生物标志物，更为基于外泌体的靶向治疗策略开发奠定了理论基础。研究首次将TOB1的抑癌功能与外泌体circRNA调控网络相联系，为理解胃癌发生发展的分子机制提供了全新视角。未来针对该通路的药物开发或将成为胃癌精准治疗的新突破口。