Emp3通过激活TGF-β/Smad3信号通路促进单侧输尿管梗阻小鼠肾纤维化进程

本研究针对慢性肾脏病(CKD)中肾纤维化(RF)的治疗难题，通过RfxCas13d基因编辑技术靶向敲低Emp3基因，揭示其通过结合TGFBR2激活TGF-β/Smad3通路驱动纤维化的新机制。动物实验显示Emp3敲除显著改善UUO模型小鼠的肾脏病理损伤，体外实验证实Emp3过表达会加剧肾小管上皮细胞(TCMK1)的促纤维化反应。该研究为CKD的靶向治疗提供了新策略。

　　

慢性肾脏病(CKD)已成为威胁全球公共健康的"沉默杀手"，其最致命的病理特征——肾纤维化(RF)会导致不可逆的肾功能丧失。尽管已知转化生长因子-β(TGF-β)/Smad3信号通路是纤维化的核心驱动者，但上游调控机制仍存在空白。西南医科大学附属中医医院的研究团队发现，在肿瘤中已被广泛研究的表皮膜蛋白3(Emp3)可能在肾脏疾病中扮演关键角色，这项突破性成果发表在《Tissue and Cell》上。

研究人员采用三大关键技术：通过电穿孔将RfxCas13d基因编辑系统递送至UUO模型小鼠肾脏实现靶向敲低；收集临床CKD患者肾活检样本进行免疫组化分析；利用肾小管上皮细胞系(TCMK1)进行体外功能验证。

【人类活检样本收集】临床样本分析显示Emp3在CKD患者肾组织中显著上调，主要定位于肾小管细胞。

【质粒构建与克隆】创新性应用RfxCas13d系统构建Emp3特异性敲低质粒，通过输尿管逆行注射实现肾脏靶向递送。

【Emp3表达水平升高】动物实验证实UUO模型小鼠肾组织Emp3表达与纤维化程度呈正相关，免疫印迹显示其与TGF-β/Smad3通路激活同步增强。

【讨论】机制研究发现Emp3直接结合TGF-β受体2(TGFBR2)，像"分子开关"一样触发下游Smad3磷酸化级联反应。基因敲除使胶原沉积减少40%，α-SMA表达下降2.3倍，而过表达则使纤维化标志物升高1.8倍。

这项研究首次阐明Emp3-TGFBR2相互作用是TGF-β/Smad3通路激活的新机制，为开发抗纤维化疗法提供了精确靶点。采用RfxCas13d的基因编辑策略展现出显著的治疗潜力，未来或可通过纳米载体递送实现临床转化。值得注意的是，Emp3在多种器官纤维化中可能具有保守功能，这为其他纤维化疾病的治疗开辟了新思路。