环状RNA circFUT8通过稳定TNS1 mRNA调控巨核细胞前血小板形成的机制研究

本研究针对血小板生成过程中非编码RNA调控机制不明的问题，揭示了circFUT8通过结合IGF2BP2以m6A依赖方式稳定TNS1 mRNA，促进F-actin聚合和细胞骨架重排，从而调控巨核细胞前血小板形成的新机制。该发现为血小板减少症治疗提供了新靶点，发表于《Blood》杂志。

　　

血小板作为血液中的"维修工"，在止血和血管修复中发挥关键作用。然而，当骨髓中的巨核细胞(MKs)不能正常形成前血小板(PPF)时，就会导致血小板减少症，引发出血风险。尽管已知长链非编码RNA参与调控血小板生成，但占RNA总量15%的环状RNA(circRNA)在其中的作用仍是未解之谜。

研究人员通过RNA-seq技术发现，circFUT8在人脐带血造血干细胞向MKs分化过程中表达显著升高。实验显示，敲低circFUT8会导致MKs前血小板形成减少、 demarcation membrane system (DMS)结构异常，小鼠体内实验也证实circFut8缺失会降低血小板数量。深入机制研究发现，circFUT8像"分子胶水"一样结合IGF2BP2蛋白，通过m⁶A修饰保护TNS1 mRNA不被降解。TNS1作为细胞骨架调控蛋白，其稳定表达对F-actin聚合和MKs铺展至关重要——当TNS1被敲除时，MKs在细胞外基质上的铺展能力和前血小板形成均显著受损。

关键技术包括：1)人脐带血造血干细胞体外MKs分化模型；2)circRNA测序和生物信息学分析；3)RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)验证circFUT8-IGF2BP2相互作用；4)m⁶A甲基化检测技术；5)共聚焦显微镜观察细胞骨架动态。

主要研究结果：

1. circFUT8表达特征：在MKs成熟过程中表达逐渐升高，提示其可能参与血小板生成调控。
2. 功能缺失实验：通过shRNA敲低circFUT8，发现MKs的PPF减少50%，DMS结构紊乱。
3. 体内验证：小鼠模型显示circFut8缺陷导致血小板计数下降30%，骨髓MKs-血窦接触减少。
4. 分子机制：RIP实验证实circFUT8与IGF2BP2直接结合，延长TNS1 mRNA半衰期2.5倍。
5. 下游效应：TNS1维持F-actin动力学，其缺失导致MKs铺展面积缩小60%。

这项研究首次阐明circRNA通过m⁶A-reader蛋白调控血小板生成的全新通路，不仅为理解巨核细胞分化提供了新视角，更重要的是为开发靶向circFUT8/IGF2BP2/TNS1轴的治疗策略奠定了理论基础。鉴于约30%免疫性血小板减少症患者对现有治疗无应答，该发现具有重要临床转化价值。论文发表在血液学顶级期刊《Blood》，为circRNA研究开辟了新的疆域。