生物钟基因PER2通过调控Caspase-8/RIPK3/ASC复合体介导PANoptosis抑制口腔鳞癌进展的机制研究

针对口腔鳞癌（OSCC）治疗耐药难题，研究人员揭示了生物钟基因PER2通过稳定Caspase-8蛋白、促进Caspase-8/RIPK3/ASC复合体形成，激活PANoptosis（凋亡-焦亡-坏死性凋亡协同程序性死亡）的新型抑癌机制。该研究为OSCC靶向治疗提供了新策略，发表于《Cellular Signalling》。

　　

口腔鳞癌（OSCC）作为头颈部最常见的恶性肿瘤，占口腔癌病例的90%以上，全球年新增病例达38万例，但五年生存率三十年来始终徘徊在50%左右。传统治疗手段面临耐药性强、复发率高的困境，而单一靶向凋亡的疗法常因肿瘤细胞死亡逃逸失效。近年来，PANoptosis（一种整合凋亡、焦亡和坏死性凋亡的协同性程序性死亡）因其可同时激活多条死亡通路的优势，成为突破肿瘤耐药的新方向。与此同时，生物钟基因PER₂虽被证实具有抑癌作用，但其在OSCC中的具体机制尚未阐明。

重庆医科大学附属第一医院口腔颌面外科的研究团队在《Cellular Signalling》发表的研究，首次揭示了PER₂通过调控Caspase-8/RIPK3/ASC复合体介导PANoptosis抑制OSCC的分子机制。研究人员结合TCGA数据库生物信息学分析、26对临床样本验证及细胞/动物实验，采用MTT法检测增殖、流式细胞术分析凋亡、LDH释放实验评估细胞毒性，并通过分子对接和Co-IP验证蛋白互作，最后利用裸鼠移植瘤模型进行体内验证。

3.1 PER₂与PANoptosis关键基因的临床相关性
通过分析65个PANoptosis相关基因（PARGs），筛选出与OSCC预后显著相关的CASP8和MAP3K7。免疫组化显示OSCC组织中PER₂与CASP8呈正相关（r=0.75），与MAP3K7负相关（r=-0.69），且低CASP8/高MAP3K7患者生存期更短。

3.2 PER₂调控PANoptosis的生物学效应
过表达PER₂的SCC25细胞增殖抑制率达48%，凋亡率增加2.3倍，LDH释放升高，同时cleaved caspase-3、N-GSDME和p-MLKL等PANoptosis标志物表达上调；而敲低PER₂的CAL27细胞呈现相反趋势。

3.3 Caspase-8的核心调控作用
PER₂通过直接结合（结合能-9.8 kcal/mol）延长Caspase-8蛋白半衰期（从6h延长至12h），但不影响其mRNA水平。使用抑制剂Z-IETD-FMK可逆转PER₂诱导的PANoptosis。

3.4 复合体组装的关键机制
Co-IP证实PER₂过表达使Caspase-8/RIPK3/ASC复合体形成增加3.5倍，该效应可被Caspase-8抑制剂阻断，表明PER₂通过稳定Caspase-8促进PANoptosome组装。

3.5 体内实验验证
裸鼠模型中，PER₂过表达组肿瘤体积减少62%，重量下降57%，且肿瘤组织内PANoptosis标志物表达显著升高。

该研究不仅首次阐明PER₂-Caspase-8/RIPK3/ASC轴在OSCC中的抑癌机制，更创新性地提出：通过靶向生物钟基因调控PANoptosis复合体组装，可克服传统单一死亡通路靶向治疗的局限性。值得注意的是，PER₂可能通过抑制PDK1-RSK1通路减少Caspase-8 T265位点磷酸化（既往研究显示PER₂能促进PDK1降解），这为深入解析死亡通路转换机制提供了新思路。未来需进一步明确PER₂调控的PANoptosome亚型及其与免疫微环境的互作，这些发现将为开发OSCC时序疗法奠定理论基础。