菠萝叶乙醇提取物中2,4-二羟基-6-甲基苯甲醛的分离及其网络药理学、分子对接、ADMET与细胞毒活性研究

本研究从菠萝叶乙醇提取物中分离出2,4-二羟基-6-甲基苯甲醛（o-Orsellinaldehyde），通过网络药理学预测其靶向COMT、HDAC2、CA9等关键蛋白，分子对接显示其与抗癌剂香豆素活性相当，ADMET分析证实良好口服生物利用度（0.55），体外细胞毒实验（LC50 11.41 μg/mL）验证其抗肿瘤潜力，为天然产物开发提供新思路。

　　

热带植物菠萝（Ananas comosus）在传统医学中因其抗氧化、抗炎等活性被广泛应用，但其叶片中活性成分的挖掘仍存在空白。近年来，多靶点天然产物成为药物研发热点，而菠萝叶中是否含有可干预肿瘤、神经系统疾病等的新型化合物尚待探索。

为解决这一问题，来自孟加拉国Gono Bishwabidyalay和Jahangirnagar University的研究团队开展了系统性研究。他们通过乙醇浸提、铅盐沉淀除鞣质、水解及制备薄层色谱等技术，从菠萝叶中分离出关键化合物，并利用IR、NMR（¹H、¹³C、HMBC）鉴定为2,4-二羟基-6-甲基苯甲醛。研究人员进一步采用SwissADME、SwissTargetPrediction等工具进行网络药理学分析，通过AutoDock Vina完成分子对接，并采用卤虫致死实验（BSLT）评估细胞毒性。

研究结果揭示：

1. 化合物分离与鉴定：通过多步分离纯化获得22 mg目标化合物，光谱数据证实其结构为2,4-二羟基-6-甲基苯甲醛（R_f=0.74），该物质在Agrocybe praecox等真菌中曾有报道，但在菠萝叶中属首次发现。
2. ADMET特性：该化合物符合Lipinski五规则（零违规），口服生物利用度达0.55，但存在肾毒性风险（概率0.65），需后续验证。
3. 靶点网络：通过Venny 2.0分析发现7个抗癌相关靶点，包括HDAC6（组蛋白去乙酰化酶6）、CA9（碳酸酐酶9）等，其中与CA9结合能达-6.5 kcal/mol，形成4个氢键。
4. 体外活性：相比阳性对照硫酸长春新碱（LC₅₀ 2.73 μg/mL），该化合物对卤虫的LC₅₀为11.41 μg/mL，显示显著细胞毒性。

这项发表于《Clinical Traditional Medicine and Pharmacology》的研究，首次系统阐明了菠萝叶中2,4-二羟基-6-甲基苯甲醛的多靶点作用机制。其重要意义在于：① 为天然产物抗癌研究提供新候选分子；② 通过网络药理学-分子对接-实验验证的研究范式，证实该化合物可同时干预肿瘤微环境酸化（CA9）和表观遗传调控（HDAC6）；③ 研究采用的BSLT方法为资源有限地区开展药物筛选提供可行方案。未来需通过癌细胞系实验和动物模型进一步验证其治疗潜力。