无序连接介导的双价相互作用增强Notch信号通路转录激活复合体组装机制研究

来自国际团队的研究人员针对Notch信号通路中CSL-RAMANK-MAML异源三聚体组装能量学难题展开研究。通过建立强制异源三聚体模型结合等温滴定量热技术，首次量化了无序连接片段（RAMANK）通过双价结合使CSL结合能提升1000倍的关键机制，为理解转录激活复合体的多价组装提供了新范式。

　　在细胞命运决定过程中，Notch信号通路通过独特的异源三聚体调控基因表达。最新研究发现，该三聚体由DNA结合蛋白CSL、Notch受体胞内段(RAMANK)和共激活因子MAML组成，其中RAMANK通过无序连接区串联RAM基序和锚蛋白重复域(ANK)，形成间距约45?的双价结合位点。研究人员创新性地采用等温滴定量热(ITC)技术，结合强制异源三聚体模型进行能量学分析，揭示这种"分子钓鱼线"般的无序连接区能将ANK结构域的有效浓度提升三个数量级，使CSL结合亲和力增强1000倍。特别值得注意的是，当将标准状态调整为更接近生理的蛋白浓度时，无序连接区对转录激活复合体组装的促进作用更为显著。这项研究不仅阐明了Notch信号转导中"双价结合-无序连接"的协同机制，更为解析其他多价组装体系提供了普适性研究框架。