泰国养殖亚洲鲈鱼中舒伯特气单胞菌的致病性与毒力机制研究

本研究针对泰国养殖亚洲鲈鱼(Lates calcarifer)爆发的高死亡率事件，首次系统揭示了舒伯特气单胞菌(Aeromonas schubertii)的致病特征。研究人员通过细菌分离、实验感染、组织病理学和全基因组测序等技术，证实该菌可通过浸浴(87%死亡率)和注射(90%死亡率)途径引发多器官坏死和肉芽肿病变，鉴定出209个毒力基因(含T3SS/T6SS分泌系统和溶血素等关键因子)，为水产养殖疾病防控提供了重要理论依据。

　　

在东南亚水产养殖业中，亚洲鲈鱼(Lates calcarifer)因其生长快、市场价值高而成为重要经济物种。然而随着集约化养殖的发展，疾病问题日益突出，已知病原体包括传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)和运动性气单胞菌败血症(MAS)等。近年来，一种原本主要感染人类的舒伯特气单胞菌(Aeromonas schubertii)开始在水生动物中蔓延，已在蛇头鱼和罗非鱼中引发严重疫情，但其对亚洲鲈鱼的致病机制尚属未知。

朱拉隆功大学兽医学院野生动物与水生动物病理学卓越中心的研究团队，在《BMC Veterinary Research》发表的研究中，系统揭示了该菌对亚洲鲈鱼的致病特征。2020-2021年泰国中部两个养殖场爆发不明原因疾病，造成80%以上的死亡率。研究人员从病鱼内脏分离出两株细菌(CHULA2021a/b)，通过MALDI-TOF MS质谱和生化实验鉴定为A. schubertii。实验采用浸浴(10⁶ CFU/mL)和腹腔注射(10⁶ CFU/尾)两种感染方式，结合组织病理学、免疫组化和全基因组测序等技术展开研究。

主要技术方法包括：从暴发养殖场采集病鱼样本进行细菌分离培养；通过MALDI-TOF MS和生化实验鉴定菌种；建立实验感染模型评估不同感染途径的致病性；采用H&E染色和免疫组化分析组织病变；利用Illumina HiSeq平台进行全基因组测序，通过VFDB数据库预测毒力基因。

研究结果部分显示：
【临床特征与细菌分离】自然感染鱼表现为嗜睡、游动缓慢，内脏出现白色结节。分离菌株在血琼脂平板上呈现β-溶血，生化特性与参考菌株ATCC 43700一致。

【组织病理学】肝脏、脾脏和肾脏出现广泛炎症细胞浸润和多灶性坏死，肝组织中发现含有细菌的肉芽肿样结构，提示慢性感染过程。

【实验感染】浸浴和注射组分别达到87%和90%的死亡率(X²(2)=62.660,p<0.01)，病理变化与自然感染一致。免疫组化显示细菌抗原主要存在于头肾吞噬细胞和坏死区域。

【基因组分析】菌株基因组约4.2 Mb，GC含量61%。系统发育分析显示与罗非鱼分离株亲缘关系最近。共鉴定209个毒力基因，其中125个与粘附相关(70%为鞭毛基因)，77个属分泌系统基因(T3SS和T6SS为主)，还包括溶血素A(hylA)和细胞毒性肠毒素Act(act)等毒素基因。

这项研究首次证实A. schubertii对亚洲鲈鱼的强致病性，揭示了其通过肉芽肿形成实现免疫逃逸的机制。基因组分析发现的T3SS/T6SS分泌系统和多种毒素基因，为解释其跨宿主传播能力提供了分子基础。研究成果不仅填补了该菌在水产病原学中的知识空白，更为重要的是，为开发针对性防控措施（如疫苗靶点筛选）提供了关键科学依据。研究者特别指出，该菌对2%盐度的耐受性说明其能适应咸淡水环境，这对东南亚广泛采用的混养模式具有重要警示意义。未来需要进一步研究毒力基因的表达调控机制，以及环境因素对疾病传播的影响。