RIP1激酶抑制通过双重机制缓解急性肝衰竭：抑制肝细胞凋亡与调控巨噬细胞TNF-α分泌

本研究针对急性肝衰竭（ALF）高死亡率且缺乏有效疗法的临床难题，通过RIP1激酶抑制剂Nec-1（necrostatin-1）干预LPS/GalN诱导的小鼠ALF模型，发现其能显著降低血清ALT/AST水平（P<0.001），抑制肝细胞凋亡（TUNEL阳性率下降50%）并减少巨噬细胞TNF-α分泌（P<0.01）。该研究首次阐明RIP1通过调控TNF-α/Caspase-3通路与巨噬细胞活化双重机制缓解ALF，为靶向干预提供新策略。

　　

急性肝衰竭（ALF）被称为"肝脏的闪电战"，其病情进展迅猛且死亡率高达50%，但临床治疗手段却长期局限于肝移植和人工肝支持。更棘手的是，ALF患者常伴随全身炎症反应综合征（SIRS），其中巨噬细胞过度活化释放的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）会形成"细胞因子风暴"，进一步加速肝细胞死亡。面对这一临床困境，宁波大学李爱春团队在《European Journal of Medical Research》发表的研究，揭示了受体相互作用蛋白激酶1（RIP1）在ALF中的关键作用。

研究人员采用经典的小鼠LPS（脂多糖）/D-半乳糖胺（GalN）诱导ALF模型，通过腹腔注射RIP1激酶特异性抑制剂Nec-1（5 mg/kg）进行干预。主要技术包括：血清ALT/AST检测评估肝损伤程度，TUNEL染色和Western blot（Caspase-3剪切体检测）分析细胞凋亡，ELISA测定巨噬细胞培养上清TNF-α浓度，以及流式细胞术（Annexin V/PI双染）定量肝细胞凋亡率。

RIP1抑制显著改善肝功能

H&E染色显示Nec-1预处理使肝小叶结构破坏程度减轻，充血区域减少50%。血清学检测证实ALT和AST水平分别下降至模型组的35%和42%（P<0.001），同时血清TNF-α浓度降低68%（P<0.01）。

双重阻断细胞死亡通路

Western blot显示Nec-1使Caspase-3剪切体表达量降低82%。在L02人肝细胞系中，Nec-1预处理使TNF-α+ACTD诱导的凋亡率从42%降至15%（P<0.001），证实RIP1通过死亡受体通路调控凋亡。

调控巨噬细胞炎症风暴

机制研究发现Nec-1能抑制LPS刺激的RAW264.7巨噬细胞TNF-α分泌，且该作用独立于其对肝细胞的直接保护效应。

这项研究首次阐明RIP1激酶在ALF中具有"双刃剑"特性：既通过TNF-α/FADD/Caspase-8通路介导肝细胞凋亡，又调控巨噬细胞炎症因子分泌。Nec-1的双重干预作用为ALF治疗提供新思路——相比直接靶向TNF-α可能引发的免疫紊乱，调控其下游关键节点RIP1更具安全性优势。值得注意的是，研究团队在讨论部分特别指出，RIP1抑制剂需与凋亡抑制剂（如zVAD）联用以避免诱发程序性坏死，这一发现对临床联合用药方案设计具有重要指导价值。