甲基化辅助GC-MS技术突破传统色谱局限：黄精多糖中单糖的全面解析与物种特异性标记物发现

针对传统PMP-HPLC法无法检测酮糖和酸性糖的技术瓶颈，研究人员开发了甲基化辅助GC-MS新方法，首次在黄精多糖中检出果糖（14.35–18.55 μg/mg），并鉴定出α-半乳糖醛酸等物种特异性标记物，为中药多糖质量控制提供了突破性解决方案。

　　

在传统中药研究领域，黄精多糖因其显著的免疫调节和降血糖活性被《中国药典》列为关键质量标志物（Q-marker）。然而，其复杂的单糖组成犹如"分子密码"，尤其是酮糖（如果糖）和酸性糖（如半乳糖醛酸）的检测长期受限于传统分析技术。PMP-HPLC等常规方法因衍生化反应缺陷，导致这些关键成分成为"消失的拼图"，严重阻碍了黄精药材的精准质控和物种鉴别。

安徽中医药大学（Anhui University of Chinese Medicine）的研究团队在Bin Wang教授和Jinmei Ou教授的带领下，突破性地开发了甲基化辅助GC-MS分析策略。这项发表于《Journal of Chromatography A》的研究，通过优化衍生化条件（35℃反应12小时）和采用BR-17色谱柱，在20分钟内实现了10种单糖的基线分离，首次绘制出黄精多糖的完整"单糖图谱"。

关键技术包括：1）建立甲基化衍生-GC-MS联用平台，使用电子轰击离子源（EI）检测；2）采集自河南洛阳、安徽池州和云南玉溪的黄精样本（AUCM-2024-017至019），经生药学专家Ou Jinmei鉴定为P. sibiricum、P. cyrtonema和P. kingianum；3）通过特征碎片离子比区分α/β-吡喃糖异构体。

【突破性发现】
• 酮糖检测瓶颈突破：首次在三种黄精多糖中定量果糖（Fru），含量为P. sibiricum（18.55 μg/mg）> P. cyrtonema（16.90 μg/mg）> P. kingianum（14.35 μg/mg），解决了PMP-HPLC无法检测酮糖的历史难题。
• 物种特异性标记物：发现P. kingianum独含α-半乳糖醛酸（α-Gal，19.95 μg/mg）；P. sibiricum以葡萄糖（Glc，135.45 μg/mg）和核糖（Rib，26.90 μg/mg）为特征；P. cyrtonema则富含葡萄糖醛酸（GlcA，38.40 μg/mg）。
• 总量差异显著：总多糖含量PSP（299.50 μg/mg）> PKP > PCP，为药材等级划分提供量化依据。

【结论与展望】
该研究建立的甲基化-GC-MS方法如同"分子显微镜"，首次揭示了黄精多糖中酮糖的存在及其物种分布规律。通过识别α-Gal等特异性标记物，为《中国药典》收载的三个黄精基原药材建立了可量化的鉴别标准。更重要的是，该方法学突破不仅适用于黄精，其衍生化策略（如CH₃I甲基化）和BR-17色谱柱选择，为其他中药多糖的精细结构解析提供了普适性技术框架。未来结合NMR等技术的多维度验证，将推动中药多糖研究进入"全组分解析"的新时代。