基于HILIC-FLD技术的母体血浆N-糖基化特征解析：胎儿和新生儿溶血病的新型诊断与预测生物标志物

本研究针对ABO血型不合导致的胎儿和新生儿溶血病（HDFN）缺乏有效预防措施的临床难题，通过HILIC-FLD技术系统分析了母体血浆N-糖基化特征。研究人员发现5个差异糖链峰及异常糖基化模式（如分支化、三唾液酸化等），建立的LglycoP模型在发现队列和验证队列中AUC均>0.80，为ABO-HDFN的早期预测提供了新型精准工具，尤其可弥补抗体效价检测假阳性的临床缺陷。

　　

在产科临床实践中，ABO血型不合引发的胎儿和新生儿溶血病（HDFN）犹如一柄悬剑——虽然83%病例表现为轻度溶血，但仍有2.3%未干预病例会进展为致命的水肿胎，而现有抗体效价检测的敏感性不足50%。更棘手的是，这种最常见的新生儿溶血病类型至今缺乏可靠的早期预测手段，导致临床医生常在"过度干预"与"延误治疗"间艰难权衡。

来自深圳市第四人民医院（伦理批号KY-2024-02）的研究团队独辟蹊径，将目光投向母体血浆中翩翩起舞的糖链分子。这些附着在蛋白质上的N-聚糖（N-glycan）不仅是细胞的"糖衣密码"，更可能是免疫风暴的早期信使。研究人员采用亲水相互作用色谱-荧光检测联用技术（HILIC-FLD），如同给糖分子装上荧光追踪器，在发现队列（40例HDFN患者与匹配对照）中绘制出精细的糖基化图谱。

关键技术包括：1）建立发现队列和验证队列（n=42）的双阶段研究设计；2）通过超高效液相色谱分离荧光标记的N-聚糖；3）采用逻辑回归模型（LglycoP）对色谱峰进行机器学习建模；4）应用受试者工作特征曲线（AUC-ROC）评估模型性能。

结果揭示三大发现

1. 糖链指纹特征：HDFN孕妇血浆中存在5个显著差异的糖链色谱峰，其结构特征呈现"三高"现象——高分支度、高三唾液酸化（trisialylation）、高二/三半乳糖基化（di/tri-galactosylation）。
2. 预测模型效能：基于糖链峰的LglycoP模型在验证队列中保持稳定预测力（AUC>0.80），显著优于传统抗体效价检测。
3. 机制线索：异常唾液酸化模式暗示母体存在"糖基化炎症反应（glyco-inflammatory response）"，可能通过促进抗体Fc段与胎儿红细胞结合加剧溶血。

讨论与展望
这项发表于《Journal of Chromatography B》的研究首次建立母体血浆N-糖组与ABO-HDFN的定量关联。尤为重要的是，该模型能有效区分抗体效价检测中的假阳性人群，为临床决策提供"第二意见"。通讯作者Wenlan Liu指出，糖链特征可能反映母胎界面潜在的免疫对话失调——就像破译了一组新的糖密码，未来或可据此开发阻断糖基化异常的干预策略。

研究也存在样本量有限等局限，但Yike Wu团队强调，这种非侵入性检测策略特别适合孕期动态监测。随着糖组学技术的普及，这项"糖链预警系统"有望改写ABO-HDFN的临床管理范式，让更多新生儿远离溶血危机。