综述：细胞外囊泡药物递送的分子工程策略：挑战与前景

这篇综述系统探讨了细胞外囊泡（EVs）作为药物载体的分子工程策略，重点突破其天然局限（如载药量低、靶向性差），通过内源性/外源性装载和体内工程（in vivo engineering）技术提升EVs的治疗性能，为跨屏障递送（如血脑屏障BBB）和疾病治疗（如肿瘤、纤维化）提供新思路。

　　

Abstract
细胞外囊泡（EVs）凭借天然生物相容性和细胞间通讯能力成为革命性药物载体，但其临床转化受限于载药量、靶向性和系统清除率等瓶颈。分子工程通过改造EVs膜表面（如CD47过表达延长循环）和载药技术（如siRNA装载），赋予其超越天然功能的治疗潜力。

Introduction
EVs是由哺乳动物细胞、细菌等分泌的磷脂双层囊泡，亚型包括外泌体（exosomes）、微泡（microvesicles）等。其膜表面整合蛋白（如CD63、ICAM-1）和糖脂结构赋予天然靶向性，能穿越血脑屏障（BBB）。EVs携带的核酸（线粒体DNA^17-21）、蛋白质和细胞器可调控受体细胞功能，在缺血性脑卒中（间充质干细胞EVs促进神经再生³⁶）和纤维化疾病中展现疗效。但天然EVs仅能递送生物发生期包裹的内源性分子，亟需工程化改造。

Objectives of EV engineering
核心目标包括：① 通过表面配体（如整合素）增强器官趋向性；② 利用CD47-SIRPα通路逃逸巨噬细胞吞噬³⁰；③ 装载外源药物（如化疗小分子）扩大治疗谱。肝/肺等器官的非特异性蓄积是靶向优化的重点。

EV engineering approaches
三大策略各具特色：

1. 内源性装载：基因编辑供体细胞过表达治疗性miRNA或膜蛋白（如PD-L1³⁴）；
2. 外源性修饰：电穿孔法装载siRNA，点击化学偶联靶向肽（如RGD）；
3. 体内工程：植入工程化细胞实时分泌功能化EVs，突破体外制备的产量限制。

Challenges for EV engineering
关键挑战在于：① 载药效率与EV完整性的平衡；② 规模化生产的标准化；③ 体内代谢路径的精准示踪。CD47的免疫调节可能引发血栓风险，需优化表面分子配伍。

Summary
分子工程将EVs从天然信使转化为可编程的“智能递送系统”，通过跨学科技术（如合成生物学、纳米技术）推动其向临床落地，为肿瘤、神经退行性疾病等提供突破性治疗方案。