狮爪扇贝幼体对携带pirAB毒素基因的AHPND相关霍乱弧菌的易感性研究及其生态风险警示

本研究首次揭示狮爪扇贝(Nodipecten subnodosus)幼体对虾源AHPND致病菌Vibrio campbelliiVCAHPND-VP3的易感性，通过浸染实验证实高浓度(5×106 CFU/mL)可致100%死亡率，全基因组测序发现pVA1型质粒携带的pirAB毒素基因是致病关键，为沿海养殖系统病原传播风险提供重要预警。

　　

在热带东太平洋海域，一种被称为"狮爪"的巨型扇贝(Nodipecten subnodosus)因其可达218毫米的壳高和150克的闭壳肌重量，成为水产养殖业追捧的"珍宝扇贝"。然而这种稀缺物种的自然种群密度不足2只/平方米，幼虫收集量更是低至1.7只/采集器，使得人工养殖成为必然选择。但近年来，秘鲁等南美国家在尝试规模化养殖时，频繁遭遇细菌性大规模死亡事件，其中源自对虾急性肝胰腺坏死病(AHPND)的致病菌尤其引人担忧——这种由携带pirAB毒素基因的弧菌引发的疾病，已给全球对虾养殖业造成数十亿美元损失，而其对贝类的影响却鲜为人知。更令人忧虑的是，南美沿海养殖场普遍采用未经处理的开放式水循环系统，这可能导致AHPND病原体通过排水传播至周边生态系统。

为此，秘鲁Tumbes地区Centro Colectivo Educativo Experimental de Biología y Biotecnología Acuática y Acuícola de Puerto Pizarro (CEBAP)的研究团队开展了一项开创性研究。他们首次评估了狮爪扇贝幼体对从凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)分离的AHPND阳性霍乱弧菌(Vibrio campbellii_VCAHPND-VP3)的敏感性，并与本地分离的溶藻弧菌(V. alginolyticus)进行致病性对比，相关成果发表在《Journal of Invertebrate Pathology》。

研究采用浸染感染实验、巢式PCR检测pirAB基因、比较基因组分析等关键技术。从对虾肝胰腺分离的VC_AHPND-VP3菌株经TCBS培养基筛选和MLST分型确认，同时从健康扇贝中分离4株弧菌作为对照。实验选用240只壳高5-20毫米的实验室培育幼体，设置梯度浓度感染组，通过96小时死亡率统计和器官载菌量检测评估敏感性。

Juveniles N. subnodosus susceptibility
实验显示5×10⁶ CFU/mL浓度可致100%死亡，而低浓度组虽无显著死亡，但巢式PCR在鳃和胃组织中检出pirAB基因，证实亚临床感染存在。

Bacterial isolation and molecular characterization
全基因组测序揭示VC_AHPND-VP3携带63-70 kb的pVA1型质粒，除pirAB外还含有毒力基因和移动遗传元件，而本地分离的溶藻弧菌P12株不含该质粒。

Comparative pathogenicity assays
尽管两种弧菌在扇贝体内的摄取率相似，但仅VC_AHPND-VP3引发高死亡率，证实pirAB毒素是致病关键因素。

Discussion
研究表明pVAHPND质粒可通过水平转移使非宿主物种获得致病性，养殖场排水可能使扇贝成为AHPND的"生态储主"。与成年扇贝对V. alginolyticus的抵抗力不同，幼体表现出显著易感性，提示发育阶段特异性风险。

这项研究首次证实AHPND相关弧菌可跨物种感染经济贝类，为沿海多物种养殖系统的生物安全管控提供了关键科学依据。研究者建议对虾养殖场应加强排水消毒，并监测周边贝类养殖区的pirAB阳性弧菌流行率，这对保障南美新兴扇贝养殖产业可持续发展具有重要实践意义。