墨西哥养殖罗非鱼中首次鉴定鳗弧菌、星状诺卡氏菌和无乳链球菌的致病性研究及其对淡水养殖业的警示

墨西哥研究人员针对养殖罗非鱼（Oreochromis niloticus）爆发性死亡事件，首次分离鉴定出Edwardsiella anguillarum、Nocardia asteroides和Streptococcus agalactiae三种致病菌，通过生化检测、实时PCR和16S rRNA测序确认其99.63%-100%序列相似性，并经腹腔注射实验证实致病性，死亡率达20-31%，为拉丁美洲水产病害防控提供关键数据。

　　

在淡水养殖业蓬勃发展的背景下，罗非鱼（Oreochromis niloticus）作为全球重要的经济鱼种，其养殖规模持续扩大。然而，近年来墨西哥多个养殖场频繁报告罗非鱼出现肉芽肿病变和突发性死亡，死亡率高达20%-31%，严重威胁当地水产经济。这一现象引起了墨西哥国立渔业研究所（Instituto de Acuacultura del Estado de Sonora）研究团队的高度关注，因为此前拉丁美洲尚未系统报道过这类病原体的流行情况。

为揭示病因，Daniel Coronado-Molina团队在Morelos、Jalisco和Chiapas三个州的发病养殖场采集病鱼脾脏样本，通过革兰氏染色、生化检测结合实时PCR技术，首次在墨西哥养殖罗非鱼中鉴定出三种高致病性病原体：革兰氏阴性短杆菌鳗弧菌（Edwardsiella anguillarum）、需氧放线菌星状诺卡氏菌（Nocardia asteroides）以及革兰氏阳性球菌无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）。16S rRNA测序显示这些菌株与GenBank数据库参考序列的相似性分别达99.63%、99.87%和100%。研究人员通过腹腔注射健康罗非鱼的生物测定实验证实，感染鱼体表现出嗜睡、游动异常、体色变暗等典型症状，接种后10天内出现高死亡率（虽未观察到肉芽肿病变），且能从死亡/存活鱼脾脏中重新分离出相同病原体。该研究发表于《Microbial Pathogenesis》，填补了拉丁美洲水产病原谱系的重要空白。

关键技术包括：1）从三个地理区域（Morelos、Jalisco、Chiapas）采集临床样本；2）采用麦康凯琼脂（McConkey Agar）和胰蛋白酶大豆琼脂（TSA）进行选择性培养；3）IMViC生化测试和CBA血琼脂溶血分析；4）实时荧光定量PCR（real-time PCR）快速筛查；5）16S rRNA基因测序比对；6）腹腔注射（intraperitoneal injection）动物感染模型。

【Samples】
在死亡率达20-31%的养殖场中，研究人员观察到脾脏表面肉眼可见的肉芽肿病变（Supplementary Material 1），其中Jalisco州样本呈现两种不同的革兰氏阴性短杆菌菌落形态。

【Isolation and Identification】
通过表型特征和分子生物学鉴定，确认SIN样本中的两种菌株能在30°C麦康凯琼脂上生长但不发酵乳糖，IMViC测试显示葡萄糖利用特性，且无CBA溶血现象。

【16S rRNA Sequencing】
尽管鱼类对肉芽肿感染的免疫应答机制尚不明确，但测序数据证实这些病原体与亚洲、非洲报道的罗非鱼致病株高度同源，提示可能存在跨国传播风险。

该研究首次证实墨西哥罗非鱼对国际已知病原体的易感性，为建立区域性生物安全体系提供科学依据。值得注意的是，虽然实验周期内未再现肉芽肿病变，但病原体持续存在于脾脏的现象表明可能存在潜伏感染。作者强调需加强进出口检疫，并开发针对Edwardsiella-Nocardia-Streptococcus混合感染的防控策略。CONACHYT资助项目A1-S-36629的支持凸显了该研究对拉丁美洲水产健康管理的战略价值。