丹参多糖-Mn2+-PLGA复合佐剂增强H9N2疫苗免疫效力的机制研究

本研究针对H9N2禽流感疫苗免疫原性弱的难题，创新性地采用PLGA纳米载体共封装丹参多糖(SMP)和Mn2+制备复合佐剂MS-PLGA-H9N2。实验证实该佐剂能显著提升鸡只特异性IgG抗体和HI效价，激活CD4+/CD8+T细胞，平衡Th1/Th2反应，并通过多组学分析揭示其通过cGAS-STING通路增强免疫应答的机制，为新型禽流感疫苗研发提供重要理论依据。

　　

禽流感病毒H9N2亚型在全球家禽养殖业持续肆虐，不仅造成重大经济损失，更因频繁跨种传播被WHO列为潜在人畜共患病威胁。传统油佐剂疫苗虽广泛应用，却存在细胞免疫激活不足、保护周期短等缺陷。面对这一困境，河北农业大学的研究团队独辟蹊径，将中医药智慧与现代纳米技术相结合，开发出具有"智能缓释"功能的复合佐剂系统，相关成果发表在《Poultry Science》期刊。

研究团队采用双乳化-溶剂挥发法制备PLGA纳米颗粒，动态光散射和透射电镜表征粒径形貌，通过BCA法测定抗原包封率。选用90只AA肉鸡建立免疫模型，设置6组对照（PBS、单纯抗原、铝佐剂、油佐剂等），采用ELISA检测血清抗体，流式细胞术分析淋巴细胞亚群，结合转录组和蛋白质组进行多组学联合分析，并通过HE染色评估生物安全性。

表征结果显示成功制备出粒径219.6±5.10 nm、包封率69.40%的球形纳米颗粒，在4℃下稳定保存14天。免疫效果方面，MS-PLGA-H9N2组在35天时仍维持最高HI效价（7.2 log2），较油佐剂组提高1.5倍；流式检测显示CD4⁺和CD8⁺T细胞比例分别达41.3%和29.7%，显著高于其他组别。机制研究发现该佐剂同步上调IFN-γ（156.7 pg/mL）和IL-6（243.5 pg/mL），实现Th1/Th2无偏应答，并通过激活cGAS-STING通路使IFN-β分泌量提升2.1倍。组学分析揭示ABC转运体和细胞因子-受体相互作用通路显著富集，脾脏免疫荧光证实淋巴鞘区域CD8⁺T细胞浸润增加。

这项研究创新性地构建了"中药成分-无机离子-生物材料"三元协同的疫苗递送系统，首次证实SMP与Mn²⁺在禽类免疫中的协同效应。其重要意义在于：①突破传统佐剂难以兼顾体液/细胞免疫的技术瓶颈；②通过PLGA缓释特性延长免疫刺激周期；③为开发不依赖抗生素的绿色养殖方案提供新思路。特别值得注意的是，该研究建立的"纳米载体-免疫应答-多组学验证"研究范式，为后续兽用疫苗佐剂研发提供了可借鉴的方法学框架。