YTHDF2通过靶向甲基化MYC增强直肠癌细胞放疗敏感性的机制研究

本研究针对直肠癌放疗抵抗这一临床难题，揭示了m6A阅读蛋白YTHDF2通过促进MYC mRNA降解和激活Hippo信号通路增强放疗敏感性的新机制。研究人员通过建立获得性放疗抵抗的结直肠癌细胞模型，结合转录组测序和m6A测序技术，发现YTHDF2通过m6A依赖性方式调控MYC表达，进而影响辐射诱导的细胞凋亡和G2/M期阻滞。该研究为克服直肠癌放疗抵抗提供了新的分子靶点和治疗策略。

　　

放疗是局部晚期直肠癌的标准治疗手段，但约三分之二患者会出现放疗抵抗，导致治疗效果不佳。这种获得性放疗抵抗的分子机制尚不明确，成为临床亟待解决的关键问题。近年来，N⁶-甲基腺苷（m⁶A）修饰作为重要的表观遗传调控机制，在肿瘤发生发展中发挥重要作用，但其在直肠癌放疗敏感性调控中的功能鲜有报道。

山东大学肿瘤中心放射肿瘤科的研究团队在《Journal of Radiation Research》发表的研究中，通过建立获得性放疗抵抗的结直肠癌细胞模型（HCT-116-R和CX-1-R），发现m⁶A阅读蛋白YTHDF2在放疗抵抗细胞中显著下调。研究人员利用慢病毒系统调控YTHDF2表达，结合高通量转录组测序和m⁶A测序技术，揭示了YTHDF2通过m⁶A依赖性方式促进致癌转录因子MYC mRNA降解的新机制。

研究采用的主要技术方法包括：通过累积X射线照射建立获得性放疗抵抗细胞系；慢病毒介导的基因过表达和敲除；克隆形成实验评估放疗敏感性；流式细胞术检测细胞周期和凋亡；RNA免疫共沉淀（RIP）验证YTHDF2与MYC的直接结合；RNA稳定性实验分析mRNA降解动力学；以及裸鼠移植瘤模型验证体内效果。

YTHDF2在获得性放疗抵抗细胞中下调

通过转录组分析发现，YTHDF2在放疗抵抗细胞HCT-116-R和CX-1-R中mRNA和蛋白水平均显著降低。功能实验证实，敲低YTHDF2增强细胞克隆形成能力，减少辐射诱导的凋亡和G2/M期阻滞；而过表达YTHDF2则产生相反效果。

YTHDF2通过m⁶A依赖性方式调控MYC表达

高通量测序鉴定出MYC是YTHDF2的下游靶标。RIP实验证实YTHDF2直接结合MYC mRNA，RNA稳定性实验显示YTHDF2加速MYC mRNA降解。Western blot证实YTHDF2负调控MYC蛋白表达，且MYC过表达可逆转YTHDF2的放疗增敏作用。

Hippo信号通路参与YTHDF2的放疗增敏机制

研究发现YTHDF2过表达增加MST1/2、LATS1和YAP的磷酸化水平，减少核内YAP积累，表明Hippo通路激活。MYC过表达则抑制该通路活性，形成YTHDF2与MYC的竞争性调控关系。

该研究首次阐明YTHDF2-MYC-Hippo轴在直肠癌放疗抵抗中的关键作用，为临床逆转放疗抵抗提供了新思路。研究发现YTHDF2通过双重机制增强放疗敏感性：一方面通过降解m⁶A修饰的MYC mRNA降低MYC表达；另一方面激活Hippo信号通路抑制YAP核转位。这种多靶点调控机制不仅丰富了m⁶A修饰在肿瘤放疗领域的理论基础，也为开发联合靶向治疗策略提供了实验依据。特别是针对MYC过表达的放疗抵抗患者，YTHDF2激活剂可能成为潜在的放疗增敏剂。