苯醚甲环唑对核盘菌的抑菌机制及生理毒性研究：基于细胞壁损伤与膜通透性调控的解析

本研究针对核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)对传统杀菌剂抗性加剧的现状，系统评估了三唑类杀菌剂苯醚甲环唑(difenoconazole)的基线敏感性及作用机制。研究发现该药剂通过破坏细胞壁几丁质合成、降低麦角固醇(ergosterol)含量、诱导活性氧(ROS)积累等多重途径抑制菌丝生长，EC50均值达0.2305±0.1924 μg/mL，为核盘菌茎腐病(SSR)防控提供了新型候选药剂及抗性治理策略。

　　

核盘菌茎腐病是威胁全球油料作物的毁灭性病害，其病原菌核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)能侵染700余种植物，在中国可导致油菜减产50%以上。传统杀菌剂如多菌灵(carbendazim)和异菌脲(dimethachlone)因长期单一使用已出现广泛抗性，亟需开发新型防控策略。天津高校基础研究基金资助项目团队在《Crop Protection》发表的研究，首次系统解析了三唑类杀菌剂苯醚甲环唑(difenoconazole)对核盘菌的作用机制。

研究人员采用2022年从四川油菜田采集的97株核盘菌野生型菌株，通过EC₅₀测定、显微观察、生化分析及基因表达检测等技术，发现苯醚甲环唑能显著改变菌丝形态、抑制菌核形成，并揭示其通过干扰麦角固醇(ergosterol)合成、破坏细胞膜完整性、降低草酸分泌等多重途径发挥药效。

基线敏感性分析显示，苯醚甲环唑对核盘菌的EC₅₀值呈正态分布（均值0.2305±0.1924 μg/mL），变异系数达39.2倍，提示自然种群存在潜在抗性风险。生理机制研究发现：1）药剂处理导致菌丝尖端分枝增多，透射电镜显示细胞壁增厚与细胞器损伤；2）与刚果红(Congo red)联用实验证实其通过抑制几丁质合成破坏细胞壁；3）诱导活性氧(ROS)爆发，使膜通透性下降37.2%，麦角固醇含量降低42.5%（P<0.05）。分子机制方面，2.2 μg/mL苯醚甲环唑处理显著上调固醇14α-脱甲基酶基因(CYP51)和ABC转运蛋白基因(Ssabc)表达，但未发现与其它DMI类杀菌剂的交叉抗性。

该研究不仅建立了苯醚甲环唑对核盘菌的敏感性基线，更创新性地揭示其通过"细胞壁-细胞膜-代谢毒素"多靶点协同作用机制。区别于传统DMI类药剂仅靶向麦角固醇合成的单一模式，苯醚甲环唑能同步抑制核盘菌的致病因子（草酸和果胶酶）分泌，这为开发多靶点杀菌剂提供了理论依据。田间防效试验显示其对油菜叶片保护和治疗效果与多菌灵相当，具备替代现有抗性药剂的潜力。研究强调监测CYP51基因过表达等抗性风险，对制定核盘菌茎腐病的可持续治理策略具有重要指导价值。