大口黑鲈病毒(LMBV)主要衣壳蛋白优势免疫原性表位的筛选与鉴定及其疫苗开发潜力研究

本研究针对大口黑鲈养殖业面临的病毒性病害难题，分离鉴定出高致病性大口黑鲈病毒(LMBV)，并首次系统筛选其主要衣壳蛋白(MCP)的优势免疫原性表位。通过原核表达获得M1-M4四个蛋白片段，发现M2和M3片段能显著提升血液细胞计数、免疫酶活性(AKP/SOD/ACP/T-AOC)和免疫基因(TNF-α/IgM/MHCI-α等)表达，使相对存活率(RPS)分别达64.9%和70.7%，为开发高效LMBV亚单位疫苗奠定理论基础。

　　

在水产养殖业蓬勃发展的今天，大口黑鲈(Micropterus salmoides)因其生长快、适应性强等特点已成为我国重要经济鱼种，年产量超过88万吨。然而随着养殖密度增加，由大口黑鲈病毒(Largemouth bass virus, LMBV)引发的疫情正造成严重经济损失。这种2008年首次在广东发现的虹彩病毒能导致90%以上死亡率，其特征性症状包括皮肤溃疡、肝脏出血等组织病变。目前疫苗接种仍是防控病毒病的最有效手段，但传统全蛋白疫苗存在免疫效率低、潜在副作用等问题，筛选关键免疫优势表位成为疫苗研发的突破口。

西南大学的研究团队在《Fish 》发表的研究中，从四川广安发病养殖场采集典型病鱼，通过EPC细胞系成功分离LMBV毒株。研究基于主要衣壳蛋白(Major capsid protein, MCP)的结构特征将其分为M1-M4四个片段进行原核表达，采用ELISA检测其与阳性血清抗体的亲和力。通过腹腔注射免疫健康鱼体，系统检测血细胞参数、免疫相关酶活性和基因表达变化，并开展攻毒保护实验评估相对存活率(RPS)。

临床症状和病理组织学显示自然感染鱼体出现鳃丝腐蚀、皮肤溃疡和肝脏出血等典型症状，组织切片观察到肝细胞坏死、脾脏黑色素巨噬细胞聚集等病理变化。病毒分离与鉴定证实所有样本均携带LMBV，实验感染重现了自然爆发的90%高死亡率，病毒主要靶器官为心脏、肝脏和脾脏。免疫原性分析表明M2和M3片段与阳性血清呈现强结合力，免疫后显著提升红细胞、白细胞等血细胞数量，增强AKP、SOD等免疫酶活性，上调TNF-α、IgM等免疫基因表达。保护效力评估显示M3免疫组RPS达70.7%，显著高于全蛋白组的61.4%。

该研究首次明确LMBV-MCP的M3区段为优势免疫原性表位，其诱导的免疫保护效果超越全蛋白疫苗。这一发现为开发高效、安全的LMBV亚单位疫苗提供了精确分子靶点，不仅有助于解决大口黑鲈养殖业的病毒病防控难题，也为其他水产病毒疫苗研发提供了表位筛选的技术范式。研究采用的"结构分析-分段表达-多维度免疫评价"技术路线，展现出在鱼类疫苗研发领域的广泛应用前景。