MLH1表观遗传突变在MLH1缺陷型结直肠癌中的鉴定及其临床意义

为解决当前Lynch综合征(LS)筛查策略可能漏诊MLH1表观遗传突变的问题，研究人员针对MLH1缺陷且MLH1甲基化(MLH1me+)的结直肠癌(CRC)患者开展回顾性队列研究。通过qMSP和CpG焦磷酸测序技术，在≤55岁且BRAF V600E阴性患者中发现12.9%存在组成型MLH1甲基化，提出优化筛查策略，为LS精准诊断提供新依据。

　　

在结直肠癌(CRC)的诊疗领域，Lynch综合征(LS)作为最常见的遗传性癌症易感综合征，其筛查一直存在"漏网之鱼"。传统筛查策略依赖肿瘤组织MLH1甲基化(MLH1^me+)和BRAF V600E突变作为散发性错配修复缺陷(dMMR)CRC的标志，却可能将一类特殊患者——携带组成型MLH1甲基化（又称表观遗传突变）的LS患者错误归类。这类患者因缺乏典型家族史且甲基化检测通常仅针对肿瘤组织，往往被误诊为散发病例，错失癌症监测和家族遗传咨询的机会。

北京协和医院的研究团队在《Human Pathology》发表的研究，通过两个独立队列（48例探索队列和159例验证队列），采用实时甲基化特异性PCR(qMSP)和CpG焦磷酸测序技术，系统评估了dMMR CRC患者中组成型MLH1甲基化的发生频率。研究发现，在MLH1^me+肿瘤患者中，12.9%存在正常结直肠黏膜组织的MLH1甲基化，其中≤55岁患者检出率高达50%。这些患者普遍年轻（中位年龄56岁）、BRAF V600E阴性，且表现出独特的MMR蛋白异质性表达模式。

关键技术包括：1）对肿瘤组织进行MLH1甲基化筛查；2）采用qMSP检测配对正常结直肠黏膜DNA；3）CpG焦磷酸测序验证甲基化水平；4）建立基于年龄和BRAF状态的优化筛查流程。

【研究结果】

1. 探索队列：在31例MLH1^me+患者中鉴定出4例（12.9%）组成型甲基化，包括2例高水平全甲基化和2例低水平嵌合甲基化。≤55岁亚组检出率显著升高至50%。

2. 验证队列：在35例MLH1缺陷/BRAF阴性病例中，仅1例≤55岁患者检出组成型甲基化，而>55岁组未发现阳性病例。所有阳性病例均无显著家族史，但1例发生3种LS相关癌症。

3. 病理特征：观察到MMR蛋白异质性表达模式，癌前病变中早期部分MLH1/PMS2丢失现象。

【结论与意义】
该研究首次系统评估了中国人群dMMR CRC中组成型MLH1甲基化的流行状况，揭示其占MLH1^me+病例的12.9%。提出的优化筛查策略（针对≤55岁且BRAF阴性患者）将检测阳性率提升至50%，显著优于现行方案。这些发现改写了LS筛查范式，强调对年轻dMMR CRC患者进行正常组织甲基化检测的必要性，为精准遗传咨询和癌症风险管理提供新依据。研究还观察到表观遗传突变特有的分子特征，为阐明MLH1沉默机制提供重要线索。