BRD8通过TGF-β1介导的肿瘤相关巨噬细胞极化抑制结直肠癌进展的机制研究

本研究针对结直肠癌(CRC)免疫微环境调控难题，发现溴结构域蛋白8(BRD8)通过上调转化生长因子β1(TGF-β1)驱动M2型肿瘤相关巨噬细胞(TAM2)极化，进而促进CRC转移。浙江医院团队采用免疫组化、流式细胞术和转基因小鼠模型，证实靶向BRD8/TGF-β1轴可重塑肿瘤微环境，为CRC免疫治疗提供新靶点。论文发表于《Discover Oncology》。

　　

在全球恶性肿瘤负担中，结直肠癌(CRC)始终位居致死率前三甲。尽管诊疗技术不断进步，约70%患者确诊时已进展至II/III期，30%术后患者出现复发转移，晚期患者五年生存率不足30%。这种严峻现状的背后，是肿瘤微环境(TME)中免疫细胞与癌细胞的复杂"共谋"——特别是占TME最大比例的肿瘤相关巨噬细胞(TAM)，其M2型极化(TAM2)可通过分泌抗炎因子构建免疫抑制屏障，成为助长癌转移的"帮凶"。

浙江医院普通外科的研究团队将目光聚焦于表观调控因子BRD8。这个隶属于TIP60乙酰转移酶家族的蛋白，虽在神经肌肉疾病中有过报道，但其在CRC免疫调控中的角色仍是未解之谜。通过分析30例CRC临床样本，研究人员首先捕捉到关键线索：BRD8在肿瘤组织中异常高表达，且与临床分期、淋巴结转移显著相关，ROC曲线证实其可作为预后预测标志物(AUC=0.82)。更引人注目的是，免疫组化显示BRD8高表达区域密集分布着CD163⁺的TAM2细胞，流式检测揭示CD11b⁺CD163⁺细胞比例随BRD8水平升高而增加，同时M2标志物Arg1、IL-10、CD206的mRNA表达同步上调。

为破解机制，团队构建了IL-4诱导的TAM2模型。当用shRNA敲低BRD8后，免疫荧光显示CD163⁺细胞占比锐减，Transwell实验表明CRC细胞的迁移侵袭能力随之减弱。通过GSE203236数据库筛选，研究者锁定TGF-β1为关键下游靶点——其在CRC组织中的表达与BRD8呈正相关(r=0.76)。回补实验证实，过表达TGF-β1可逆转BRD8缺失对TAM2极化的抑制，重新激活CRC细胞的恶性表型。

关键技术包括：1) 30例CRC患者队列的免疫组化和流式细胞分析；2) IL-4诱导的THP-1巨噬细胞极化模型；3) CCK-8和Transwell检测细胞增殖迁移；4) 裸鼠移植瘤模型评估体内效果；5) GSE203236数据库挖掘差异基因。

研究结果部分：
3.1 BRD8在CRC患者中过表达
临床样本显示BRD8 mRNA在晚期(III/IV期)和肝转移患者中显著升高，与肿瘤大小、TNM分期和淋巴结转移正相关(P<0.05)。

3.2 BRD8过表达促进TAM2浸润
CD163⁺细胞在BRD8高表达肿瘤中富集，流式检测CD11b⁺CD163⁺比例增加2.3倍，M2标志物mRNA水平同步上调。

3.3 BRD8敲除抑制TAM2极化
shRNA干扰使CD163蛋白表达降低61%，Arg1、IL-10等mRNA下降50%-70%，共培养体系中的CRC细胞活力减弱。

3.4 BRD8上调TGF-β1
生物信息学筛选出TGF-β1为TOP5差异基因，其与BRD8表达呈正相关(P<0.001)。

3.5 TGF-β1过表达逆转表型
回补实验使CD11b⁺CD163⁺细胞恢复至对照组的85%，肿瘤细胞侵袭能力增强2.1倍。

3.6 体内验证
裸鼠模型中，BRD8敲除使肿瘤体积缩小58%，重量减轻64%(P<0.001)。

这项研究首次揭示BRD8-TGF-β1-TAM2轴在CRC免疫逃逸中的核心作用，其创新性体现在三方面：1) 发现BRD8具有"双刃剑"特性——虽在胶质瘤等癌症中促癌，但在CRC中通过免疫调控发挥独特功能；2) 阐明表观遗传调控与免疫微环境重塑的分子桥梁；3) 提供联合靶向表观遗传和免疫治疗的新策略。未来针对该通路的抑制剂开发，或可打破CRC转移的"免疫耐受壁垒"，为晚期患者带来曙光。