褪黑素通过调控COX-2/MDM2/p53/miR-155轴增强顺铂抗肝癌疗效的机制研究

本研究针对肝癌治疗中顺铂(Cis)细胞毒性副作用与疗效受限的临床难题，通过大鼠肝癌模型揭示褪黑素(Mel)可协同顺铂通过下调COX-2/MDM2/miR-155通路、上调p53/caspase-3促进肿瘤凋亡，同时通过抗氧化和抗炎作用保护正常肝细胞，为肝癌联合治疗提供新策略。

　　

肝癌是全球癌症相关死亡的主要原因之一，晚期诊断率高且治疗选择有限。顺铂作为常用化疗药物虽能诱导肿瘤细胞凋亡，但其严重的肝毒性犹如"双刃剑"，极大限制了临床应用。与此同时，生物钟紊乱与肝癌发生发展的关联日益受到关注，而作为核心生物钟调节剂的褪黑素，近年被发现具有多重抗癌特性——从抑制肿瘤血管生成到调节免疫微环境，但其与化疗药物的协同机制仍待破解。

开罗大学医学院生理学系的研究团队在《Future Journal of Pharmaceutical Sciences》发表的研究中，创新性地将褪黑素与顺铂联用，在二乙基亚硝胺(DENA)/四氯化碳(CCl₄)诱导的大鼠肝癌模型中，系统评估了两者对肝功能和肿瘤微环境的调控作用。研究通过检测血清ALT/AST/AFP、肝组织氧化应激指标(MDA/CAT)、炎症因子(TNF-α)及凋亡相关蛋白(p53/caspase-3)，结合MDM2/COX-2/miR-155基因表达分析和CD68/BCL-2免疫组化，首次揭示了褪黑素通过多靶点协同增强顺铂抗肝癌效应的分子机制。

关键技术方法包括：建立DENA/CCl₄诱导的大鼠肝癌模型；采用ELISA检测血清肝功能指标和肝组织炎症因子；通过qPCR分析MDM2/COX-2/miR-155表达；Western blot检测p53蛋白水平；HE染色和Masson三色染色评估肝组织病理变化；免疫组化分析BCL-2和CD68表达。

研究结果
肝功能与肿瘤标志物：肝癌组ALT/AST/AFP显著升高，顺铂单药加重肝损伤，而褪黑素联合治疗显著改善肝功能，使AFP降至接近正常水平。

氧化应激与炎症：褪黑素逆转顺铂引起的MDA升高和CAT下降，降低TNF-α水平，CD68⁺巨噬细胞浸润减少，显示其抗氧化和抗炎作用。

分子机制：

• 凋亡调控：联合治疗组p53蛋白表达较单药组提高2.1倍，caspase-3活性增加3倍，BCL-2免疫染色减弱
• 信号通路：MDM2/COX-2/miR-155表达在联合组较肝癌组分别下降62%/57%/58%
• 组织病理：联合组肝小叶结构基本恢复，胶原沉积减少67%，气球样变肝细胞消失

结论与意义
该研究突破性地证实：褪黑素不仅能通过调控MDM2/p53/miR-155轴增强顺铂诱导的肝癌细胞凋亡，还可通过抑制COX-2和CD68⁺巨噬细胞浸润改善肿瘤微环境。更重要的是，褪黑素显著减轻顺铂对正常肝细胞的毒性，表现为肝功能指标改善和肝组织结构保护。这种"增效减毒"的双重作用，为临床肝癌化疗方案优化提供了理论依据。研究首次揭示生物钟调节剂与化疗药物的协同抗肝癌机制，为开发基于昼夜节律的肿瘤联合治疗策略开辟了新方向。