CSF1R抑制剂PLX3397通过PI3K/AKT/FOXO1通路调控巨噬细胞衰老缓解实验性牙周炎

本研究针对牙周炎中巨噬细胞衰老加剧组织破坏的机制，探索了CSF1R抑制剂PLX3397通过调控PI3K/AKT/FOXO1信号通路减少ROS生成和巨噬细胞衰老的作用。结果显示，PLX3397显著减轻小鼠牙周炎症和骨吸收，为靶向宿主免疫调控的牙周炎治疗提供了新策略。

　　

牙周炎作为全球约三分之二人群罹患的慢性炎症性疾病，与糖尿病、心血管疾病等系统性疾病密切相关。传统治疗依赖机械清创，但难以完全清除深部菌斑。近年研究发现，衰老巨噬细胞通过分泌衰老相关分泌表型（SASP）因子如IL-6、IL-1β等，形成"双重炎症源"加速牙周破坏。然而，巨噬细胞衰老的具体调控机制尚不明确。

贵州医科大学口腔医学院的研究团队在《Scientific Reports》发表研究，首次揭示集落刺激因子1受体（CSF1R）抑制剂PLX3397可通过PI3K/AKT/FOXO1信号通路调控巨噬细胞衰老。研究人员建立丝线结扎诱导的小鼠牙周炎模型，结合P.g-LPS刺激的RAW264.7巨噬细胞模型，采用Micro-CT、SA-β-gal染色、免疫荧光等技术，发现PLX3397治疗显著降低牙槽骨吸收（骨密度提升23.7%）和炎症因子表达（TNF-α下降62%）。机制上，PLX3397通过抑制PI3K磷酸化（p-PI3K/PI3K比值降低1.8倍）减少FOXO1核转位，进而下调ROS水平（流式检测MFI降低45%）和衰老标志物p16/p21表达。

主要技术方法
研究采用C57BL/6小鼠构建丝线结扎牙周炎模型，通过Micro-CT量化骨吸收；体外使用P.g-LPS诱导RAW264.7巨噬细胞衰老，结合SA-β-gal染色、Western blot（检测p-PI3K、p-FOXO1等蛋白）和流式细胞术（ROS检测）分析分子机制；免疫荧光双标（F4/80⁺/p16⁺细胞）定位衰老巨噬细胞。

研究结果

1. PLX3397减轻牙周组织破坏
   Micro-CT显示治疗组牙槽骨密度较模型组提高1.4倍（p<0.001），H&E染色显示牙周膜宽度减少37.5%。

1. CSF1R抑制缓解炎症
   免疫组化显示治疗组CSF1R⁺细胞减少68%，促炎因子IL-1β表达下降54%（p<0.01）。

2. 巨噬细胞衰老调控
   免疫荧光证实模型组F4/80⁺/p16⁺双标细胞增加3.2倍，PLX3397使SA-β-gal⁺细胞减少61%。体外实验确定500nM为最佳抑制浓度。

1. PI3K/AKT/FOXO1通路机制
   Western blot显示PLX3397和PI3K抑制剂LY294002均能降低p-AKT/AKT比值（0.45倍）和ROS水平，证实该通路的核心作用。

结论与意义
该研究阐明CSF1R-PI3K/AKT/FOXO1轴通过调控ROS介导巨噬细胞衰老的新机制，首次将PLX3397（已获批用于腱鞘巨细胞瘤）拓展应用于牙周炎治疗。相较于传统机械治疗，靶向宿主衰老细胞的策略为控制"炎症-衰老"恶性循环提供了新思路，尤其适用于深牙周袋等机械清创困难病例。未来需进一步探索PLX3397对M1/M2巨噬细胞极化的影响及临床转化潜力。