乳香黄连木提取物通过调控EMT/Sirt1通路拮抗四氯化碳肝纤维化的生化与计算生物学研究

本研究针对肝纤维化防治需求，探索乳香黄连木提取物(Mastic extract)对CCl4诱导肝损伤的保护机制。研究人员通过动物实验证实该提取物可显著降低ALT/AST水平，调节EMT相关标志物(E-cadherin/vimentin)，上调Sirt1表达，并利用网络药理学锁定CYP1A1、HMGCR等关键靶点。该发现为天然产物防治肝纤维化提供了新依据。

　　

肝脏作为人体最重要的代谢器官，其纤维化病变正成为全球公共卫生的重大挑战。当前临床缺乏高效低毒的抗纤维化药物，而四氯化碳(CCl₄)等环境毒素导致的肝损伤病例持续增加。传统化学药物往往伴随严重副作用，这使得从天然植物中寻找安全有效的活性成分成为研究热点。乳香黄连木(Pistacia lentiscus L.)作为地中海地区传统药用植物，其树脂"乳香"在民间医学中早有护肝应用记载，但具体作用机制尚未阐明。

为系统评估乳香黄连木提取物的肝保护功效，研究人员设计了一套整合实验生物学与计算模拟的研究方案。通过建立CCl₄诱导的小鼠肝纤维化模型，将实验动物分为四组：空白对照组、CCl₄模型组、提取物治疗组及提取物单独对照组。采用酶联免疫法检测血清ALT（丙氨酸氨基转移酶）、AST（天门冬氨酸氨基转移酶）等肝功能指标，比色法测定氧化应激标志物MDA（丙二醛）和CAT（过氧化氢酶）活性。通过qRT-PCR（实时定量PCR）和Western blot分别检测上皮-间质转化(EMT)相关基因E-cadherin、vimentin及Sirt1在mRNA和蛋白水平的表达变化。借助HE染色（苏木精-伊红染色）和Masson染色观察肝脏组织病理学改变，免疫组化分析TGF-β（转化生长因子-β）的表达分布。进一步运用网络药理学方法构建"成分-靶点-通路"网络，结合分子对接验证活性成分与关键靶点的结合能力，并通过ADME（吸收、分布、代谢、排泄）预测评估药物代谢特性。

生化指标分析显示：CCl₄模型组ALT、AST分别升高3.2倍和2.8倍，MDA水平上升215%，而CAT活性下降62%。经乳香黄连木提取物干预后，这些指标恢复至接近正常水平，ALT、AST分别降低57%和49%，MDA减少68%，CAT活性提升2.3倍。

分子机制研究发现：提取物显著上调肝组织E-cadherin表达达2.1倍，下调vimentin表达61%，Sirt1蛋白水平增加1.8倍。免疫组化显示TGF-β阳性区域面积减少74%，与纤维化程度改善呈显著负相关。

网络药理学鉴定出32个肝纤维化相关靶点，其中CYP1A1（细胞色素P450 1A1）、CYP2C9和HMGCR（3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶）为核心靶标。分子对接证实提取物中槲皮素、山奈酚等成分与这些靶点具有强结合活性（结合能<-7.5 kcal/mol）。

组织病理学观察证实：治疗组肝小叶结构基本完整，纤维间隔形成减少82%，脂肪变性面积缩小75%，炎性细胞浸润程度显著减轻。

该研究创新性地揭示了乳香黄连木提取物通过多靶点协同作用发挥肝保护功效的机制：一方面通过调控EMT进程维持肝细胞上皮表型，另一方面激活Sirt1介导的抗氧化通路减轻氧化损伤。网络药理学与实验验证的结合，不仅证实了传统药用植物的科学价值，还为开发基于天然成分的肝纤维化治疗策略提供了理论依据。论文发表于植物药理学领域权威期刊《Fitoterapia》，其发现对解决化学性肝损伤防治这一临床难题具有重要转化意义，特别为长期接触肝毒性物质的职业人群防护提供了潜在干预方案。