花椒叶与枝提取物通过抑制CHOP和激活PPARγ促进3T3-L1脂肪细胞分化的机制研究

本研究揭示了韩国湖南地区花椒（Zanthoxylum schinifolium）叶（LZSE）和枝（TZSE）的70%乙醇提取物通过抑制内质网应激标志物CHOP、促进有丝分裂克隆扩增（MCE）及激活过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ），显著增强3T3-L1脂肪细胞分化。UPLC-ESI-Q-TOF-MS结合分子对接分析鉴定出多种潜在PPARγ激动剂成分，为代谢性疾病（如糖尿病）提供了新型天然药物候选。

　　

花椒提取物的促脂肪分化效应

韩国湖南地区花椒（Zanthoxylum schinifolium）的叶（LZSE）和枝（TZSE）70%乙醇提取物在3T3-L1前脂肪细胞中展现出显著的促分化作用。通过油红O染色和基因表达分析，发现LZSE在50-200 μg/mL浓度范围内剂量依赖性地增加脂滴积累，同时上调关键成脂基因PPARγ、C/EBPα和FABP4的表达，且无细胞毒性。值得注意的是，早期分化阶段（0-48小时）的处理效果最为显著，提示其作用靶点集中于分化启动阶段。

早期分化的分子调控机制

LZSE通过双重机制促进脂肪生成：

1. CHOP抑制：LZSE显著降低内质网应激因子CHOP的表达（48小时降低63.4%），解除其对C/EBPα/β的抑制作用，从而激活PPARγ通路。
2. 有丝分裂克隆扩增（MCE）促进：细胞周期分析显示，LZSE处理24小时后，S期细胞比例从8.6%增至10.3%，伴随周期蛋白Cyclin E和CDK2表达上调，加速细胞周期进程。

枝提取物的协同效应

与叶提取物相比，枝提取物（TZSE）表现出更强的PPARγ激活能力。报告基因实验显示，300 μg/mL TZSE使PPARγ转录活性提高3.38倍，且特异性上调PPARγ靶基因（如Glut4和PEPCK）。质谱分析揭示TZSE富含橙皮苷（hesperidin）等独有成分，分子对接证实其与PPARγ配体结合域（LBD）的关键氨基酸（Ser289、Tyr473）形成氢键，结合能达-6.5 kcal/mol，与阳性对照罗格列酮（-7.4 kcal/mol）相当。

地理来源的药效差异

与既往报道的中国产花椒甲醇提取物的抗脂肪生成作用不同，本研究强调提取溶剂（70%乙醇）和产地（韩国湖南）共同决定活性成分谱。UPLC-ESI-Q-TOF-MS鉴定出23种成分，其中新绿原酸（neochlorogenic acid）和4-咖啡酰奎宁酸（4-CQA）为主要成分，二者与PPARγ的亲和力分别为-6.8和-7.1 kcal/mol，可能通过稳定PPARγ的AF-2构象发挥激动剂效应。

转化医学价值

该研究为开发基于花椒提取物的代谢调节剂提供了理论依据，其通过CHOP-PPARγ轴调控脂肪细胞功能，或可改善胰岛素抵抗和脂代谢紊乱，且天然成分的多靶点特性可能规避合成药物（如噻唑烷二酮类）的心血管副作用。未来需进一步验证其在动物模型中的疗效及成分协同作用机制。