多重PCR技术同步检测菜豆三大病原菌：黄萎病菌(Fop)、根腐病菌(Fs)和萎蔫病菌(Cff)的创新方法

为解决菜豆根部病害诊断难题，研究人员开发了可同步检测黄萎病菌(Fusarium oxysporum f. sp. phaseoli, Fop)、根腐病菌(Fusarium solani f. sp. phaseoli, Fs)和萎蔫病菌(Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens, Cff)的多重PCR技术。通过设计特异性引物IGS1FOR/IGS1REV并优化反应条件，在57℃退火温度下获得143bp(Fs)、306bp(Cff)和609bp(Fop)的清晰条带。该方法较传统ISTA检测更高效，为菜豆病害精准防控提供新工具。

菜豆(Phaseolus vulgaris L.)根部病害常呈现相似症状，包括由尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum f. sp. phaseoli, Fop)引起的枯萎病、茄病镰刀菌(Fusarium solani f. sp. phaseoli, Fs)导致的干腐病以及萎蔫短小杆菌(Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens, Cff)引发的萎蔫病。田间混合感染给传统诊断带来挑战，而分子检测技术能精准识别病原。

研究团队开创性地建立多重PCR(m-PCR)体系，通过新设计IGS1FOR/IGS1REV引物检测Fs，结合CffFOR2/CffREV4和A280/B310引物组，在0.4-0.8μM引物浓度和57℃退火条件下，凝胶电泳可清晰区分143bp(Fs)、306bp(Cff)和609bp(Fop)的特异性条带。该技术对种子带菌检测效率与ISTA标准方法相当，且缩短了浸种时间。值得注意的是，在测试品种中仅检出Fop而未发现Fs，这为后续病原流行病学研究提供了重要线索。该成果首次实现了菜豆三大病原的同步分子检测突破。