靶向CMV-pp65495-503/HLA-A2复合体的TCR样抗体：一种治疗移植后巨细胞病毒感染的新型免疫疗法

本研究针对移植后巨细胞病毒（CMV）感染缺乏有效疗法的临床难题，开发了一种靶向CMV-pp65495-503/HLA-A2复合体的TCR样抗体hu3D7。通过高亲和力结合病毒肽-MHC复合物，该抗体能特异性激活CD8+ T细胞释放颗粒酶B（Granzyme B）和穿孔素（Perforin），在体外和动物模型中显著清除CMV感染细胞，为移植后CMV并发症提供了精准免疫治疗新策略。

　　

巨细胞病毒（CMV）感染是造血干细胞移植患者面临的致命威胁，现有抗病毒药物存在骨髓抑制、肾毒性等副作用，且无法清除潜伏感染。尤其令人担忧的是，60-90%成人携带潜伏CMV，移植后免疫抑制状态导致70%患者出现病毒再激活。传统疗法如更昔洛韦（GCV）虽能抑制病毒复制，但无法招募免疫系统精准清除感染细胞，亟需能模拟T细胞受体（TCR）识别特性的新型疗法。

福建医科大学附属第一医院国家区域医疗中心的研究团队在《Journal of Translational Medicine》发表突破性研究。他们利用合成pCMV-pp65_495-503/HLA-A2复合体作为抗原，通过杂交瘤技术筛选出特异性TCR样抗体3D7，经人源化改造获得hu3D7。该研究采用表面等离子共振（SPR）验证抗体亲和力（KD=5.33×10^-10 M），通过流式细胞术证实其对CMV感染细胞的靶向性，并利用人源化小鼠模型证明其通过激活CD8⁺ T细胞终末分化效应亚群（TEMRA）发挥抗病毒作用。

关键技术包括：1）基于流式细胞术的高通量抗体筛选平台；2）单链三聚体（SCT）蛋白表达系统构建pCMV-pp65_495-503/HLA-A2复合体；3）AlphaFold预测抗体-抗原结合表位；4）人PBMCs移植NSG小鼠模型评估体内疗效；5）Jurkat-Lucia NFAT-CD16细胞系检测抗体依赖性细胞毒性（ADCC）。

抗体开发与表征
通过ELISA和SPR证实3D7对靶标复合体的高亲和力（EC₅₀=11.9 ng/mL），流式细胞术显示其特异性结合CMV感染细胞（MFI比值>10）。AlphaFold预测揭示抗体轻链CDR1区Y32和重链CDR3区Y103分别结合病毒肽第4位（P4）和第6位（V6）氨基酸，丙氨酸扫描实验验证V6为关键结合位点。

人源化抗体功能
人源化hu3D7保持原始抗体活性（KD=5.33×10^-10 M），在效应细胞与靶细胞共培养实验中，10 μg/mL剂量即可诱导CMV感染细胞凋亡（Annexin V⁺比例提升3倍），同时使培养上清中病毒DNA拷贝数降低2个数量级。

动物模型验证
在PBMCs重建的NSG小鼠中，hu3D7治疗组外周血CMV DNA载量较对照组下降99%，肝脾组织CMV⁺细胞减少80%。机制研究表明，hu3D7促进CD8⁺ TEMRA细胞扩增（占比提升至35%），血清颗粒酶B和穿孔素水平分别增加4倍和3.5倍。

该研究首次证明TCR样抗体可通过"免疫桥接"机制激活内源性T细胞清除CMV感染，突破传统抗体仅能中和游离病毒的局限。相较于病毒特异性T细胞（VST）疗法，hu3D7具有无需个体化定制、避免移植物抗宿主病（GVHD）风险的优势。尽管存在MHC限制性（目前仅覆盖HLA-A*02:01人群），该策略为开发靶向其他HLA型别的抗体组合奠定基础，有望成为移植后CMV管理的变革性疗法。