Baylisascaris procyonis磷酸化蛋白质组图谱解析：揭示寄生虫生存关键信号网络与潜在治疗靶点

本研究针对人畜共患寄生虫Baylisascaris procyonis的致病机制不明问题，通过IMAC富集结合LC-MS/MS技术首次绘制其磷酸化蛋白质组图谱，鉴定到450个磷酸化蛋白及854个磷酸化位点，揭示胰岛素信号通路、紧密连接等关键通路调控机制，为开发抗寄生虫药物提供新靶点。该成果发表于《Parasites》杂志，填补了该领域研究空白。

　　

在北美地区，浣熊肠道寄生虫Baylisascaris procyonis正成为日益严重的公共卫生威胁。这种寄生虫的幼虫可侵入人体引发致命性脑膜炎和内脏幼虫移行症，儿童因不良卫生习惯更易感染。令人担忧的是，随着浣熊向城市迁移，人类接触风险持续升高。然而目前针对该寄生虫的治疗手段有限，其分子致病机制更是迷雾重重。蛋白质磷酸化作为真核生物最关键的翻译后修饰之一，在寄生虫发育、宿主互作等过程中发挥核心调控作用，但B. procyonis的磷酸化网络研究尚属空白。

湖南农业大学兽医学院的Qin Meng等研究人员在《Parasites》发表突破性研究，首次绘制了B. procyonis全蛋白质磷酸化图谱。通过采集中国长沙地区的浣熊肠道寄生虫样本，研究团队采用IMAC（固定化金属亲和色谱）富集技术结合高精度LC-MS/MS（液相色谱-串联质谱）分析，系统解析了该寄生虫的磷酸化调控网络。

关键技术方法包括：从浣熊肠道分离成虫样本，通过超声破碎和丙酮沉淀提取蛋白质；使用IMAC微球富集磷酸化肽段；采用EASY-nLC 1200 UPLC系统分离肽段，在timsTOF Pro质谱仪上进行检测；通过MaxQuant软件比对自定义蛔虫科特异性蛋白质数据库进行磷酸化位点鉴定。

研究结果揭示：

1. 磷酸化特征分析：鉴定到3308个磷酸化肽段，包含854个磷酸化位点（77.52%为pSer，16.16%为pThr，6.32%为pTyr），显著富集于细胞核（34.44%）和细胞质（31.11%）。

1. 功能富集分析：磷酸化蛋白主要参与细胞骨架重组（如肌动蛋白结合蛋白）、超分子复合体组装等过程，显著富集SH3结构域（Src homology 3 domain）等蛋白互作模块。

2. 通路调控机制：发现胰岛素信号通路、紧密连接（Tight junction）、内吞作用等关键通路被显著激活，其中胰岛素受体激酶（IRK）等核心元件存在多重磷酸化修饰。

3. 互作网络构建：UBQ-2（泛素结合蛋白）和核糖体蛋白构成核心调控枢纽，与糖酵解/糖异生等代谢通路密切关联。

这项研究首次系统揭示了B. procyonis通过磷酸化修饰精密调控细胞骨架动态、宿主界面互作和能量代谢的分子机制。特别值得注意的是，研究人员发现的SH3结构域富集现象提示该寄生虫可能采用独特的蛋白互作策略应对宿主环境压力。胰岛素信号通路的广泛磷酸化修饰则表明其可能通过模拟宿主代谢调控实现免疫逃逸。这些发现不仅填补了蛔虫科寄生虫翻译后修饰研究的空白，更为重要的是，研究鉴定的450个磷酸化蛋白和关键激酶（如GSK3β）为开发新型抗寄生虫药物提供了特异性靶点。未来研究可进一步探索这些磷酸化蛋白在寄生虫不同发育阶段的动态变化，以及它们作为疫苗候选抗原的潜力。该成果为理解人畜共患寄生虫的致病机制和防控策略提供了全新视角。