波斯尼亚和黑塞哥维那无症状流浪犬钩端螺旋体排放与血清阳性率研究

本研究针对钩端螺旋体病(Leptospirosis)这一全球性人畜共患病，通过qPCR检测尿液和MAT血清学分析，首次揭示波斯尼亚和黑塞哥维那地区流浪犬中15%血清阳性率和22%尿液排菌率，证实无症状犬是重要传染源，为制定"One Health"防控策略提供关键数据。

　　

钩端螺旋体病(Leptospirosis)作为全球分布的人畜共患病，其传播链中存在着令人担忧的"沉默环节"——无症状动物携带者。随着气候变化导致洪水频发、城市化进程加速，这种由致病性钩端螺旋体(Leptospira spp.)引起的疾病在温带地区的威胁日益凸显。尽管啮齿类动物被认为是主要储存宿主，但犬类因其与人类的密切接触，既可能是血清型Canicola的储存宿主，也可能成为其他血清型的偶然宿主。更棘手的是，现有诊断方法中，显微凝集试验(MAT)难以识别无症状排菌个体，而这类动物通过尿液持续污染环境，形成潜在的"隐形流行病学炸弹"。

针对这一科学难题，University of Banja Luka的研究团队在波斯尼亚和黑塞哥维那的巴尼亚卢卡地区(44°46′20″N, 17°11′27″E)展开创新研究。他们采集100份流浪犬血液和50份尿液样本，采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测尿液中的钩端螺旋体DNA，同时通过MAT检测血清中针对10种血清型的抗体。这项发表于《Acta Tropica》的研究首次揭示了该地区流浪犬群体的真实感染状况。

关键技术包括：1) 建立双平台检测体系，结合qPCR(靶向钩端螺旋体特异性基因)和MAT(检测10种血清型)；2) 在2024年6-11月雨季采集流浪犬样本；3) 采用95%置信区间进行流行病学统计分析。

研究结果呈现三个关键发现：

1. 血清学特征：15%的犬(15/100)呈现MAT阳性(效价≥100)，其中66.6%为单一血清型反应，优势血清型为Australis(占阳性样本60%)，其次为Pomona(26.67%)和Bratislava(20%)。值得注意的是，4份血清呈现2-3种血清型交叉反应。

2. 分子检测突破：qPCR检出22%(11/50)的尿液样本阳性，但其中仅1例MAT同步阳性，证实血清学检测会遗漏91%的排菌个体。这种"高排菌率-低血清阳性"的分离现象提示现行监测体系存在重大漏洞。

3. 流行病学警示：研究区域呈现Australis血清型主导的新流行特征，与传统认知中Canicola为犬类优势血清型不同，反映出血清型地域分布的动态演变。气候数据显示，样本采集期恰逢当地降水高峰(5-6月)，与环境传播理论高度吻合。

讨论部分深刻指出：这项研究改写了人们对犬类在钩端螺旋体传播链中作用的认知。无症状流浪犬通过尿液每日排放数百万钩端螺旋体，形成"环境持久性污染源"。更值得警惕的是，MAT作为金标准对排菌个体的漏检率极高，这意味着现行基于血清学的监测系统可能严重低估实际风险。研究人员特别强调，该发现对公共卫生具有双重意义：既揭示了流浪犬管理在疾病控制中的核心地位，也暴露出诊断技术更新的迫切性。

这项研究的创新价值在于：首次证实巴尔干地区存在活跃的犬源性钩端螺旋体传播链；建立qPCR+MAT联合筛查新策略；为WHO倡导的"One Health"防控提供实证基础。正如作者Sonja Obrenovi?团队所述，未来需要将分子监测纳入常规诊断，并针对优势血清型Australis开发区域性疫苗，才能有效阻断这一隐匿传播链。这些发现对气候相似地区具有重要警示作用，提示在极端天气频发背景下，需重新评估动物宿主在疾病传播中的权重。