γδ T细胞在结直肠癌中的独特特征及预后意义：基于多组学分析的免疫治疗新视角

这篇研究通过多中心队列和单细胞测序揭示了γδ T细胞在结直肠癌(CRC)中的双重特性：作为兼具先天与适应性免疫特征的效应细胞，其高浸润密度与患者生存期延长显著相关(HR=0.65, 95%CI 0.47-0.90)，且富集于错配修复缺陷(MMR-d)和BRAF突变肿瘤。创新性发现γδ T细胞在抗原呈递缺陷(B2M缺失)微环境中发挥独特抗肿瘤作用，为CRC免疫治疗提供新靶点。

　　

ABSTRACT
γδ T细胞作为连接先天与适应性免疫的特殊T细胞亚群，在结直肠癌(CRC)中的作用长期存在争议。本研究通过两个独立队列(共1,687例患者)的多重免疫组化分析，结合62例CRC单细胞RNA测序(scRNA-seq)数据，系统揭示了γδ T细胞的临床意义与作用机制。

Introduction
CRC作为全球第三大常见恶性肿瘤，现有TNM分期系统未能充分反映个体化预后差异。研究表明，肿瘤微环境中免疫细胞的特征是重要预后因素。γδ T细胞因不受MHC限制而具有快速识别肿瘤的能力，但其在CRC中的角色仍不明确——既有研究报道其通过分泌IL-17促进肿瘤进展，也发现其具有直接杀伤肿瘤细胞的能力。

Materials and methods
研究纳入芬兰两家医疗中心的手术治疗CRC患者：队列1(2000-2015年，944例)和队列2(2006-2020年，743例)。采用TRDC/TRBC1抗体标记γδ/αβ T细胞，通过数字病理定量分析空间分布。scRNA-seq数据来自人类结肠癌图谱(GSE178341)，使用Seurat和CellChat分析细胞互作网络。

Results

1. γδ T细胞的分布特征
   在170万计数的T细胞中，γδ T细胞仅占5.3%(73,119个)，但较αβ T细胞更靠近肿瘤细胞(平均距离近25%)。高γδ T细胞密度与MMR缺陷(p<0.001)、BRAF突变(p=0.004)显著相关。

2. 预后价值
   高γδ T细胞密度患者显示更长生存期：队列1中癌症特异性死亡风险降低35%(HR=0.65)，但队列2未达统计学显著性。相比之下，αβ T细胞的预后价值更稳定(HR=0.48)。

3. 单细胞解析
   scRNA-seq显示γδ T细胞与CD8⁺ T细胞/NK细胞共享细胞毒性基因特征，是IFN-γ信号的主要贡献者。值得注意的是，γδ T细胞富集的肿瘤表现出抗原呈递通路活性减弱，且与β2微球蛋白(B2M)缺失显著相关(p=0.0084)。

Discussion
本研究首次通过多组学整合证实：

• γδ T细胞具有"空间杀手"特性，倾向于浸润抗原呈递缺陷的免疫豁免型肿瘤
• 其预后价值可能通过IFN-γ依赖的细胞毒性途径实现
• 在MMR缺陷型CRC中可能补偿CD8⁺ T细胞功能不足

这些发现为开发针对免疫冷肿瘤的γδ T细胞疗法提供了理论依据，特别是对于B2M缺失的难治性CRC亚型。研究局限性包括TMA取样的代表性问题，未来需通过空间转录组等技术进一步验证。