新型GalNAc-siRNA药物RBD1016在HBV感染小鼠模型中实现持续HBsAg降低与血清学转换的机制研究及治疗潜力

本研究针对慢性乙型肝炎(CHB)功能性治愈难题，开发了靶向HBV X基因(HBx)的GalNAc-siRNA药物RBD1016。通过体外实验和两种HBV小鼠模型验证，该药物可跨基因型抑制HBV DNA复制（最大降幅3.7 log），实现HBsAg持续降低（>200天）并诱导HBsAb血清学转换，与恩替卡韦(ETV)联用显示协同效应，为CHB治疗提供了新型RNAi疗法支柱。

　　

乙型肝炎病毒(HBV)感染如同潜伏在肝脏中的"定时炸弹"，全球近3亿慢性感染者面临肝硬化和肝癌的威胁。尽管核苷(酸)类似物(NAs)能抑制病毒复制，但年功能性治愈率不足1%，且存在基因型差异和耐药性问题。更棘手的是，长期高水平的乙肝表面抗原(HBsAg)会形成"免疫麻痹"，使机体丧失清除病毒的能力。这种困境催生了科学界对新型疗法的探索，其中靶向病毒生命周期的RNA干扰(RNAi)技术尤为引人注目。

苏州瑞博生命科学有限公司的研究团队在《Molecular Therapy Nucleic Acids》发表的研究中，开发出新型GalNAc偶联siRNA药物RBD1016。该药物通过靶向HBV基因组中高度保守的X基因(HBx)，可同时沉默四种病毒转录本。研究采用双荧光素酶报告系统筛选先导化合物，通过化学修饰优化获得候选分子SR016-X2UR8（即RBD1016）。在技术方法上，团队运用了psi-CHECK报告系统测定体外活性（IC₅₀低至4.50 pM），建立HBV转基因小鼠和AAV-HBV感染小鼠模型评估体内疗效，采用SL-RT qPCR检测肝脏RISC负载siRNA，并通过ELISA/化学发光法动态监测血清标志物变化。

RBD1016在体内外展示强效抗HBV活性
体外实验显示RBD1016对A-E基因型HBV及rtM204I等耐药株均保持高效抑制，最大降低HBsAg 3.22 log₁₀ IU/mL。在HBV-Tg小鼠中，单次给药9 mg/kg可使HBsAg持续抑制至第85天（2.21 log降幅），肝脏HBx mRNA降低85.67%。

剂量方案优化揭示长效特性
比较不同给药间隔发现，3 mg/kg q8w×3方案在169天研究期内维持HBsAg最大降幅3.7 log，显著优于密集给药方案，提示延长给药间隔可增强持续疗效。

突破性免疫重建证据
在AAV-HBV模型中，3 mg/kg qw×3方案诱导HBsAb水平升至981 mIU/mL，且与HBsAg水平呈显著负相关（R²=0.6399）。长达247天的观察显示，HBsAb峰值与病毒DNA抑制期高度吻合，证实RBD1016通过持久抗原清除重建免疫应答。

协同治疗增强病毒抑制
与ETV联用使HBV DNA最大降幅达4.91 log，且协同效应在ETV停药后仍持续2个月，为临床联合用药提供依据。

该研究首次在非临床研究中证实单一siRNA药物可诱导HBsAg血清学转换，其机制与持久深度抑制抗原（<10 IU/mL）相关。RBD1016独特的化学修饰（含5'(E)-乙烯基膦酸酯）和GalNAc递送系统（RiboGal-STAR）使其在肝脏特异性富集，临床前安全数据显示NOAEL达600 mg/kg。目前该药物已进入II期临床试验（NCT05961098），其每月甚至每季度给药一次的方案有望改变CHB治疗格局。这项研究不仅为RNAi药物设计提供新范式，更通过恢复宿主免疫应答的创新机制，为功能性治愈HBV带来曙光。