富含儿茶素多酚的莲藕根提取物通过NF-κB通路增强先天免疫力并改善地塞米松诱导的免疫抑制

本研究揭示了莲藕根提取物（NRE）通过激活NF-κB信号通路，显著提升巨噬细胞中NO、ROS及促炎因子（IL-1β/IL-6/TNF-α）水平，并逆转地塞米松（DEX）诱导的脾细胞免疫抑制。UPLC-Q-TOF MS分析证实儿茶素（catechin）和没食子儿茶素（gallocatechin）是NRE的关键功能成分，为天然免疫增强剂开发提供了新思路。

　　

1. 引言
免疫系统通过识别病原体相关分子模式（PAMPs）维持机体稳态，但过度激活会导致慢性阻塞性肺病（COPD）、炎症性肠病（IBD）等疾病。莲藕根（Nelumbo nucifera）作为传统药食两用材料，其提取物（NRE）富含酪氨酸、色氨酸及儿茶素类多酚，但免疫调节机制尚不明确。本研究通过体外和离体模型，探讨NRE对先天免疫的调控作用。

2. 材料与方法
实验采用RAW 264.7巨噬细胞和BALB/c小鼠脾细胞。NRE通过80℃热水提取制备，UPLC-Q-TOF MS鉴定其活性成分。通过MTT法检测细胞活力，Griess法测定NO₂^?，ELISA分析细胞因子（IL-1β/IL-6/TNF-α），Western blot检测NF-κB通路蛋白（p65/IκBα/IKK）。离体实验采用地塞米松（DEX）诱导免疫抑制模型，评估NRE的恢复效应。

3. 结果
3.1 NRE激活巨噬细胞功能
NRE剂量依赖性增加RAW 264.7细胞中NO（达对照3倍）和ROS水平，上调iNOS和COX-2表达，且无细胞毒性（100 μg/mL）。

3.2 促炎因子表达上调
qRT-PCR显示NRE显著提升IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA水平（P<0.001），ELISA证实其蛋白分泌量增加2-4倍。

3.3 NF-κB通路激活机制
NRE促进p65磷酸化及IκBα降解，免疫荧光显示p65核转位增强，表明其通过经典NF-κB通路调控免疫应答。

3.4 逆转DEX免疫抑制
在DEX处理的脾细胞中，NRE（100 μg/mL）恢复ConA诱导的增殖活性（提升80%），并挽救IL-1β和TNF-α分泌（P<0.01）。

3.5 活性成分鉴定
MRM分析显示NRE含儿茶素（1.872 mg/g）和没食子儿茶素（4.924 mg/g）。体外实验证实二者在50 μM时可显著提升ROS和TNF-α（P<0.01），而氨基酸类成分作用较弱。

4. 讨论
NRE的免疫增强作用区别于绿茶高含量儿茶素（如绿茶粉含92.65 μg/mg没食子儿茶素），其适度激活NF-κB的特性避免了过度炎症反应。DEX模型证实NRE通过功能调节（非细胞增殖）逆转免疫抑制，为天然免疫调节剂开发提供了新方向。

5. 结论
NRE通过儿茶素多酚激活NF-κB通路，双向调节先天免疫，在免疫低下或抑制状态下具有潜在应用价值，可作为功能性食品或免疫佐剂的候选成分。