靶向m6A去甲基化酶FTO通过m6A依赖性G0/G1期阻滞克服肺腺癌奥希替尼耐药

本研究针对EGFR突变肺腺癌患者奥希替尼耐药难题，揭示FTO通过降低m6A修饰水平促进耐药的新机制。研究人员发现抑制FTO可诱导m6A依赖性细胞周期阻滞，联合FB23-2与奥希替尼能协同抑制耐药肿瘤生长，为克服靶向治疗耐药提供新策略。

　　

肺癌作为全球癌症相关死亡的首要原因，其中肺腺癌（LUAD）已成为非小细胞肺癌（NSCLC）最主要的亚型。尽管第三代EGFR酪氨酸激酶抑制剂奥希替尼显著改善了EGFR突变患者的预后，但约1-2年内出现的获得性耐药仍是临床重大挑战。现有耐药机制研究多集中于EGFR依赖性途径，但30%-50%患者的耐药原因尚未阐明。近年研究发现，RNA表观遗传修饰N⁶-甲基腺苷（m⁶A）在肿瘤发生和耐药中起关键作用，其中去甲基化酶FTO在肺癌中的角色存在争议——既有研究显示其在初治肺癌中低表达且抑制增殖，又有证据表明其参与吉非替尼耐药。这种矛盾提示FTO可能具有动态调控特征，但其在奥希替尼耐药中的作用仍属未知。

苏州第九人民医院的研究团队通过构建奥希替尼耐药细胞模型，首次揭示FTO在慢性药物压力下的表达上调现象，阐明其通过m⁶A依赖性机制促进耐药的分子通路。研究发现FTO抑制剂FB23-2能协同增强奥希替尼对耐药肿瘤的杀伤效果，这一重要成果发表于《Biochemical Pharmacology》，为克服靶向治疗耐药提供了新靶点和新策略。

研究采用梯度浓度诱导法建立H1975OR和HCC827OR耐药细胞系，通过qPCR、Western blot和m⁶A斑点杂交分析基因表达和修饰水平。利用shRNA基因沉默、CCK-8和流式细胞术评估细胞活力和周期变化，并构建患者来源类器官（PDO）模型验证临床相关性。关键实验还包括转录组测序、m⁶A-seq和体内异种移植瘤实验。

【FTO表达升高伴随m⁶A修饰减少】
耐药细胞系和患者耐药类器官中均检测到FTO表达显著上调，同时整体m⁶A修饰水平下降。生物信息学分析显示差异表达基因富集于细胞周期调控通路。

【FTO沉默逆转耐药性】
敲低FTO使耐药细胞恢复对奥希替尼敏感性，IC50值降低3-5倍。机制研究发现FTO通过去甲基化作用调控CDK2、CCND1等周期蛋白表达，诱导G0/G1期阻滞。

【FB23-2的协同治疗效应】
小分子抑制剂FB23-2在体外和移植瘤模型中均显示与奥希替尼的协同作用，联合用药组肿瘤体积较单药组减少62%-75%。患者类器官实验证实该组合可有效抑制耐药肿瘤生长。

该研究首次揭示FTO在奥希替尼耐药中的动态表达规律：基线水平低表达的FTO会在药物压力下代偿性上调，通过降低m⁶A修饰水平促进耐药。这一发现解决了既往关于FTO在肺癌中作用矛盾的争议，提出"表观遗传适应性耐药"新概念。研究创新性地将类器官模型应用于耐药机制研究，证实FTO抑制剂联合奥希替尼的临床转化潜力。从治疗角度看，靶向FTO诱导的m⁶A依赖性细胞周期阻滞不同于传统EGFR靶向策略，为克服耐药提供了全新干预途径。该成果不仅对肺腺癌治疗具有重要指导价值，也为其他肿瘤靶向治疗耐药研究提供了范式参考。