乳酸菌CCFM1365发酵葛根黄酮通过多靶点调控改善酒精性肝病的作用机制

本研究针对酒精性肝病（ALD）治疗药物疗效有限的问题，通过乳酸菌Pediococcus acidilactici CCFM1365发酵葛根黄酮（FPFS），系统探究其对LO-2肝细胞和小鼠模型的保护作用。结果表明FPFS能显著降低ALT/AST水平（51.55%/27.77%），提升SOD/CAT活性（183.2%/132.3%），并通过调节Nrf2/HO-1通路、CYP2E1抑制及肠道紧密连接蛋白（ZO-1/Occludin）修复实现多靶点治疗，为功能性食品开发提供新策略。

　　

酒精性肝病（Alcoholic Liver Disease, ALD）作为全球公共卫生难题，每年导致约300万人死亡。传统药物治疗面临疗效有限、副作用明显等瓶颈，而天然植物活性成分因其多靶点特性成为研究热点。葛根（Pueraria lobata）作为传统中药，虽富含具有抗氧化和保肝作用的异黄酮苷（如葛根素、大豆苷），但其生物利用度低的问题长期制约临床应用。与此同时，益生菌发酵技术被证明可显著提升草本化合物活性，但具体作用机制尚不明确。

针对这一科学问题，江南大学食品科学与技术国家重点实验室的研究团队创新性地采用Pediococcus acidilactici CCFM1365菌株发酵葛根黄酮（FPFS），通过体外LO-2肝细胞模型和体内小鼠实验，系统揭示了FPFS改善ALD的作用机制。该研究成果发表于食品科学顶级期刊《Food Chemistry》，为功能性食品开发提供了重要理论依据。

研究主要采用高效液相色谱（HPLC）分析黄酮转化、Lieber-DeCarli酒精饲料构建慢性ALD小鼠模型、生化指标检测（ALT/AST/TG）、免疫荧光染色（ZO-1/Occludin）、抗氧化酶活性测定（SOD/CAT）以及酒精代谢相关酶（ADH/ALDH/CYP2E1）检测等关键技术。

【Biotransformation of Pueraria lobata Flavonoids】
HPLC分析显示，CCFM1365发酵使葛根素和大豆苷等苷元含量显著提升，其中葛根素转化率达82.6%，证实发酵有效提高了黄酮生物利用度。

【In vitro hepatoprotective effects】
FPFS处理使乙醇诱导的LO-2细胞ALT/AST释放量降低47.2%/35.8%，同时TNF-α和IL-6等炎症因子水平下降逾50%，表明其具有显著的细胞保护作用。

【In vivo therapeutic effects】
小鼠实验中，FPFS组血清ALT/AST分别降低51.55%和27.77%，肝脏LPS水平下降47.71%，病理切片显示脂肪变性面积减少62.3%，证实其显著改善肝损伤。

【Mechanistic insights】

1. 抗氧化调控：FPFS使肝脏SOD和CAT活性分别提升183.2%和132.3%，通过激活Nrf2/HO-1通路增强抗氧化防御。
2. 酒精代谢调节：ADH和ALDH活性提高1.8倍，同时抑制CYP2E1表达（降低64.5%），减少有毒乙醛积累。
3. 肠道屏障修复：免疫荧光显示ZO-1和Occludin表达恢复至正常组90%以上，证实其改善"肠-肝轴"功能。

该研究首次阐明益生菌发酵葛根黄酮的多靶点作用机制：通过生物转化提升活性成分效率，同步调控氧化应激（Nrf2/HO-1）、酒精代谢（ADH/ALDH/CYP2E1）和肠道屏障（ZO-1/Occludin）三大关键通路。相比未发酵提取物，FPFS将保肝效果提升2-3倍，且无需化学修饰或复杂提取工艺。这不仅为ALD治疗提供了新型功能性食品候选物，更开创了"益生菌-中药"协同发酵的技术路径，具有重要的产业化应用价值。研究团队建议未来开展FPFS的人体临床试验，并探索其对非酒精性脂肪肝的潜在作用。