青蒿素衍生物蒿甲醚通过EGFR/HSP90通路多靶点调控代谢相关脂肪肝病(MAFLD)的分子机制研究

研究人员针对代谢相关脂肪肝病(MAFLD)现有药物治疗副作用大的问题，通过动物模型和细胞实验发现蒿甲醚(Art)能剂量依赖性改善肝脏脂质沉积。采用DARTS、CESTA和化学蛋白质组学等技术鉴定出热休克蛋白90(HSP90)和表皮生长因子受体(EGFR)为Art的直接作用靶点，揭示其通过破坏HSP90-EGFR复合物抑制脂质合成的分子机制，为MAFLD治疗提供了新型多靶点干预策略。

　　

随着生活方式改变和饮食结构西化，代谢相关脂肪肝病(MAFLD)已成为威胁全球公共健康的"沉默杀手"。这种疾病从单纯的肝脏脂肪变性可逐步发展为肝炎、纤维化甚至肝癌，目前全球患病率已高达44%，但临床治疗却面临巨大挑战——唯一获批药物瑞美替仑虽能减少肝脏脂肪，却伴随胃肠道和神经系统副作用。在这样的背景下，中国农业大学食品科学与营养工程学院精准营养与食品质量重点实验室的研究团队将目光投向了抗疟明星药物青蒿素的衍生物蒿甲醚(Artemether, Art)，这项突破性研究成果发表在《Journal of Advanced Research》上。

研究人员首先建立了高脂饮食(HFD)诱导的小鼠MAFLD模型和油酸-棕榈酸(OA-PA)诱导的肝细胞脂质沉积模型。通过药物亲和反应靶点稳定性(DARTS)、细胞热转移分析(CESTA)、生物正交化学蛋白质组学等技术，结合分子对接和基因沉默等验证手段，系统揭示了蒿甲醚的作用靶点和分子机制。

Art缓解HFD诱导的肝脏脂质积累
研究发现50 mg/kg剂量的Art能显著降低HFD小鼠体重和附睾脂肪重量，改善糖耐量异常。血清检测显示Art剂量依赖性降低ALT、AST水平，肝脏病理切片显示其有效减少脂肪空泡和炎症浸润，油红O染色证实Art-H组肝脏中性脂质含量接近正常组。在HepG2细胞中，25 μM Art即可显著抑制OA-PA诱导的脂滴形成。

HSP90是Art减少脂质沉积的直接靶点
DARTS联合LC-MS/MS在85-95 kDa区域鉴定出201个潜在靶蛋白，其中HSP90评分最高。蛋白酶稳定性实验显示50 μM Art能显著增强HSP90的抗蛋白酶解能力。生物正交探针pull-down和分子 docking证实Art通过Leu107等残基与HSP90的ATP结合口袋结合，结合能为-7.82 kJ/mol。

Art通过HSP90调控EGFR通路
靶点网络分析发现EGFR是Art、MAFLD和HSP90的共同关联靶点。Art与EGFR激酶域(TKD)结合能达-6.77 kcal/mol，形成与PHE723等残基的疏水作用。Co-IP实验证实HSP90与EGFR存在相互作用，αFold3预测显示Art可同时结合EGFR-HSP90复合物。在HSP90敲除细胞中，Art的降脂作用被显著削弱，表明HSP90是其关键介质。

Art通过EGFR依赖途径改善MAFLD
EGFR抑制剂厄洛替尼(Erlotinib)处理的小鼠中，Art未能进一步改善肥胖和肝脏功能指标。细胞实验显示，在EGFR沉默或抑制的HepG2细胞中，Art对脂质合成相关基因(fasn、acc、scd1)的抑制作用消失。但Art在EGFR过表达细胞中仍能下调ACC、SCD1蛋白，表明其可通过直接结合EGFR发挥调控作用。

这项研究首次阐明蒿甲醚通过"双靶点"作用模式治疗MAFLD：既可直接结合EGFR的酪氨酸激酶域，又能通过HSP90调控EGFR稳定性。这种多靶点协同作用不仅解释了Art卓越的降脂效果，还避免了单一靶点药物常见的耐药性问题。特别值得注意的是，Art能缓解EGFR抑制剂导致的脱发等副作用，为MAFLD的联合用药提供了新思路。该发现不仅为青蒿素类药物拓展了代谢疾病治疗的新适应症，也为开发基于天然产物的多靶点抗MAFLD药物奠定了理论基础。