靶向分泌蛋白Cig1-血红素互作的全阶段侵袭性隐球菌病治疗策略研究

为解决隐球菌病治疗中多器官感染和生物屏障阻碍药物递送的难题，西南大学医学研究院团队创新性提出以分泌蛋白Cig1为共同靶点，通过其与血红素（Hemin）的相互作用设计靶向脂质体（Hemin Lip）。该研究证实Cig1在隐球菌、感染巨噬细胞及肺脑组织中高表达，Hemin Lip可精准识别并清除胞内外病原体，显著提升治疗效果。该策略为复杂真菌感染提供了新型靶向递送模型，相关成果发表于《Asian Journal of Organic Chemistry》。

　　

隐球菌病是由新型隐球菌（Cryptococcus neoformans）引起的致命系统性感染，每年导致超65万人死亡。其治疗面临三大难题：真菌荚膜屏障、巨噬细胞内寄生逃逸、血脑屏障（BBB）阻碍药物入脑。传统疗法需针对不同感染阶段设计多重靶向策略，导致药物递送系统（DDS）复杂化。西南大学医学研究院的研究团队独辟蹊径，发现隐球菌分泌的甘露糖蛋白Cig1在病原体表面、感染巨噬细胞及肺脑组织中广泛分布，可作为跨越多屏障的"共同靶点"。通过表面等离子共振（SPR）和分子 docking技术，团队证实血红素（Hemin）与Cig1具有高亲和力（Kd=9.81×10^?7 mol/L），据此开发了Hemin修饰的脂质体（Hemin Lip）。

研究采用基因敲除、蛋白质重组、纳米载体构建等关键技术。通过构建cig1Δ突变株验证靶点特异性，利用骨髓源性巨噬细胞（BMDMs）和bEnd.3细胞建立体外血脑屏障模型，采用小动物活体成像和磁共振成像（MRI）评估靶向效率。

3.1 Cig1作为全阶段感染标志物
免疫荧光显示Cig1在野生型隐球菌表面、感染BMDMs及肺脑血管内皮特异性表达，而cig1Δ突变株中完全缺失，证实其作为跨屏障靶点的可行性。

3.2 纳米递药系统构建
MALDI-TOF-MS证实成功合成DSPE-PEG_2k-Hemin偶联物。制备的Hemin Lip/AmB粒径85.6±2 nm，载药量9.3%，48小时缓释60%药物。分子对接揭示Hemin与Cig1的GLY-71和ASP-122形成氢键。

3.3 体外靶向验证
SPR显示Hemin Lip与Cig1结合常数达1.2×10^?6 mol/L。共聚焦显微镜观察到Hemin Lip在野生型隐球菌的摄取量是普通脂质体的3.2倍，且能特异性识别感染BMDMs。

3.4 体内靶向特性
DiR标记实验显示Hemin Lip在感染小鼠肺脑中的蓄积量较对照组高4.8倍。CLSM证实其可穿越BBB，与病灶区Cig1共定位。

3.5 治疗效能突破
Hemin Lip/AmB使感染小鼠生存率提升至80%，肺脑真菌载量降低2个数量级。MRI显示感染信号完全消失，且肾毒性显著低于游离AmB。

3.6 平台普适性验证
将策略拓展至白蛋白纳米粒（Hemin@BSA NP），电镜显示50 nm均匀颗粒，同样展现隐球菌靶向能力。

该研究开创性地提出"病原体分泌蛋白-宿主微环境"协同靶向新范式，突破传统多靶点修饰的复杂性。Hemin Lip实现"一石三鸟"：穿透真菌荚膜、靶向感染巨噬细胞、跨越BBB，为耐药菌感染和中枢神经系统感染提供全新解决方案。鉴于血红素转运系统在病原体的保守性，该策略有望拓展至结核杆菌等胞内寄生菌的治疗，推动抗感染纳米药物的临床转化。