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利用土著芽孢杆菌联合体实现重油高效生物降解及土壤修复
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年07月31日 来源:Environmental Technology & Innovation 7.1
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为解决重油污染土壤修复效率低的难题,研究人员从克拉玛依油田分离筛选出4株高效降解菌株(B. halotolerans S1、B. subtilis S2/S6、B. paralicheniformis S4),构建5种芽孢杆菌联合体。最优联合体(S1+S2+S4/S6)30天内降解34.5%重油,对C20-C32烷烃降解率达61.1%,TPH去除率35.4%,显著优于单菌株。该研究为石油污染土壤修复提供了高效生物解决方案。
随着全球能源需求增长,重油开采量持续上升,但其高粘度、复杂组分和低生物可利用性导致土壤污染治理成为世界性难题。传统物理化学修复方法存在成本高、二次污染等缺陷,而单一菌株的生物修复效率往往不足20%。如何通过微生物协同作用突破重油降解瓶颈,成为环境微生物学研究的热点。
新疆大学生态与环境学院(Key Laboratory of Oasis Ecology of the Ministry of Education)的研究团队从克拉玛依油田的油污样本中分离出4株具有降解潜力的芽孢杆菌,通过自由组合构建5种联合体。研究发现含B. halotolerans S1、B. subtilis S2和B. paralicheniformis S4/S6的联合体表现出卓越性能:在矿物盐培养基中30天降解34.5%重油,对铁(87.9%)、钒(46.0%)、镍(60.0%)的提取效率显著提升;在模拟修复实验中,对油泥总石油烃(TPH)去除率达35.3%,尤其对长链n-烷烃(C20-C26和C28-C32)降解效率突破59%。该成果发表于《Environmental Technology》,为复杂石油污染治理提供了创新思路。
研究采用多组学联用技术:通过扫描电镜(SEM)观察菌体形态,16S rDNA测序进行菌种鉴定;利用气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析n-烷烃降解谱;采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)检测重金属提取率;结合傅里叶变换红外光谱(FT-IR)解析烃类官能团转化。
【筛选与鉴定】从油污样本中分离的6株菌经初筛(油平板生长直径)和复筛(排油圈测定),最终选定4株芽孢杆菌。扫描电镜显示菌体呈杆状带鞭毛,分子鉴定确认S1为B. halotolerans,S2/S6为B. subtilis,S4为B. paralicheniformis。
【联合体构建】通过测定OD600、脱氢酶活性(OD485)和油平板生长性能,发现联合体A(S1+S2+S4)和B(S1+S2+S6)的菌悬液吸光度达1.8,脱氢酶活性超1.5,显著优于单菌株。
【重油降解】联合体B降解效率达34.5%,GC-MS显示其对C8-C29烷烃降解呈双峰特征:短链(C8-C14)降解率97.2%,长链(C20-C29)达94.4%。FT-IR谱图中1745 cm-1处羰基峰增强,证实烃类氧化为醛酮类中间体。
【土壤修复】添加小麦麸改良的油泥经联合体处理30天后,TPH去除动力学符合一级反应(k=0.015 d-1),对植烷降解率近80%。ICP-MS显示联合体A对Fe、V、Ni的提取率分别达87.9%、46.0%和60.0%。
该研究首次证实含B. halotolerans的芽孢杆菌联合体可通过协同代谢网络高效降解重油组分:B. subtilis产生的生物表面活性剂增强烃类溶解性,B. paralicheniformis的烷烃羟化酶(alkB)催化长链烷烃断裂,而B. halotolerans则通过P450酶系参与芳烃氧化。这种功能互补机制使联合体在C20以上烷烃降解效率较单菌株提升2倍,为油田土壤原位修复提供了可规模化应用的微生物制剂。未来研究需通过宏基因组学进一步解析菌群互作机制,优化联合体配比以适应复杂环境。
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