靶向NQO2的黄芪苷通过ROS-内质网应激通路诱导肝癌免疫原性细胞死亡

本研究针对肝癌免疫治疗响应率低的难题，探索了天然黄酮苷类化合物黄芪苷（ASG）的抗肿瘤机制。研究人员发现ASG通过靶向醌氧化还原酶2（NQO2）促进ROS积累和内质网应激，诱导免疫原性细胞死亡（ICD），显著增强抗PD-L1抗体疗效，为肝癌联合免疫治疗提供新策略。

　　

肝癌作为全球第六大高发肿瘤，其独特的免疫耐受特性导致PD-1/PD-L1抑制剂单药响应率不足20%。免疫原性细胞死亡（ICD）虽能激活抗肿瘤免疫，但现有诱导剂难以协调内质网应激（ER stress）与损伤相关分子模式（DAMPs）释放的平衡。温州医科大学附属第五医院/丽水市中心医院的研究团队在《Free Radical Biology and Medicine》发表研究，揭示传统中药成分黄芪苷（ASG）通过创新机制突破这一瓶颈。

研究采用CCK-8法检测细胞活力、流式细胞术分析凋亡、免疫共沉淀鉴定靶点、分子对接验证结合位点，并建立Hepa1-6荷瘤小鼠模型评估联合治疗效果。人类肝癌组织样本经伦理审查后用于机制验证。

抗肿瘤效应验证
ASG在7种肝癌细胞系中展现剂量依赖性生长抑制（IC₅₀ 49.62-178.02 μM），通过线粒体膜电位崩解和ROS爆发诱导细胞凋亡。

靶点发现与机制解析
表面等离子共振技术锁定NQO2为ASG直接作用靶点（K_D=3.2 μM），ASG结合促使NQO2泛素化降解，进而激活PERK-eIF2α-ATF4-CHOP内质网应激通路，关键标志物p-PERK/p-eIF2α/GRP78表达显著上调。

ICD诱导特征
ASG处理触发典型ICD三联征：钙网蛋白（CRT）膜移位、HMGB1核质转位和ATP释放，促进骨髓来源树突细胞（BMDCs）成熟标志CD80/CD86/MHC II表达提升2.1-3.8倍。

协同免疫治疗
小鼠模型中ASG联合αPD-L1使肿瘤体积缩小68.5%，肿瘤浸润CD8⁺ T细胞增加3.2倍而Tregs减少61%，显著优于单药组。

该研究首次阐明ASG通过"NQO2-ROS-ER stress"轴诱导ICD的分子机制，突破传统化疗药仅引起应激反应但缺乏免疫激活的局限。临床转化方面，ASG与PD-L1阻断剂的协同效应为冷肿瘤免疫增敏提供新方案，其天然产物特性更具安全性优势。团队提出的双通路激活模型（氧化应激+免疫原性死亡）为开发新型ICD诱导剂提供理论框架。