电针足三里/三阴交通过GR/GILZ信号通路逆转手术应激诱导的小鼠树突状细胞成熟障碍

本研究揭示了电针（EA）在ST36/SP6穴位通过调控糖皮质激素受体（GR）/糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白（GILZ）信号通路，有效逆转手术应激导致的树突状细胞（DCs）成熟抑制现象。实验证实EA能降低血清皮质酮（CORT）和促肾上腺皮质激素（ACTH）水平，上调DCs表面CD40、CD86及MHC-II表达，并恢复IL-1β/IL-6炎症因子分泌，为围手术期免疫调节提供了非药物干预新策略。

　　

1 引言

围手术期免疫变化主要由手术创伤和神经内分泌反应驱动，其中下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴通过调节糖皮质激素（GC）和促肾上腺皮质激素（ACTH）分泌发挥核心作用。树突状细胞（DCs）作为抗原提呈的关键免疫细胞，其表面CD11c分子及共刺激分子（CD80/CD86/CD40）的表达水平直接决定免疫应答强度。手术应激可导致DCs数量减少和功能抑制，而GC通过激活GR/GILZ通路诱导DCs耐受表型。既往研究表明，电针刺激足三里（ST36）和三阴交（SP6）穴位可调节HPA轴活性，但其对DCs成熟的具体机制尚未阐明。

2 材料与方法

采用C57BL/6J雄性小鼠建立剖腹探查术模型，分为对照组、模型组、电针组（EA）和非穴位电针组（NEA）。EA组接受2/15Hz交替频率的ST36/SP6穴位刺激，NEA组刺激尾肛连线旁开3mm的非穴位点。通过流式细胞术检测DCs表面标志物（CD11c⁺CD40⁺、CD11c⁺MHC-II⁺），ELISA定量血清CORT/ACTH，qPCR和Western blot分析GR/GILZ表达。GR拮抗剂RU486用于验证通路机制。

3 结果

3.1 手术应激时空特异性抑制DCs成熟

术后12小时DCs的CD86和MHC-II表达降至最低（p<0.05），72小时内未恢复基线水平。

3.2 电针逆转DCs成熟障碍

EA组CD40/CD86/MHC-II表达显著高于模型组（p<0.05），而NEA组无此效应，证实穴位特异性。

3.3 HPA轴调控机制

EA组血清CORT/ACTH水平较模型组降低47.3%和52.1%（p<0.01），且GR/GILZ mRNA和蛋白表达同步下调。

3.4 细胞因子网络重塑

EA恢复手术抑制的IL-1β/IL-6表达至对照组水平（p>0.05），而NEA组仍显著低于对照组。

3.5 GR/GILZ通路验证

RU486处理使DCs成熟标志物提升至EA组水平（p>0.05），直接证实GR/GILZ介导免疫抑制。

4 讨论

手术应激通过HPA轴过度激活→GC释放→GR/GILZ信号上调→DCs功能抑制的级联反应导致免疫麻痹。2/15Hz电针通过"穴位-神经-内分泌-免疫"多维调控，阻断该通路的关键节点：

1）抑制CORT/ACTH过度分泌；

2）下调GR/GILZ表达解除DCs成熟抑制；

3）恢复IL-1β/IL-6促炎微环境。

值得注意的是，电针频率选择具有生物学特异性：2Hz主要激活脑啡肽系统，15Hz则平衡脑啡肽与强啡肽释放，这可能是其优于2/100Hz刺激的关键因素。

5 结论

电针ST36/SP6通过GR/GILZ通路重塑手术应激下的免疫稳态，为围术期免疫保护提供可临床转化的非药物干预方案。未来需开展性别差异研究和更长观察窗口的实验以完善机制图谱。