泰国北部临床与监测样本中耐万古霉素屎肠球菌的基因型与表型特征分析

为解决医院获得性感染中耐万古霉素屎肠球菌(VREfm)的多重耐药性、环境持久性及高传播性问题，泰国清迈大学的研究团队对107株临床与监测分离株进行了耐药谱、毒力基因分布、生物膜形成及遗传背景分析。研究发现所有菌株均携带vanA基因且对多种抗生素耐药，83.7%临床分离株和68.7%监测分离株具有中度生物膜形成能力，全基因组测序(WGS)揭示了ST17和ST262两种序列型。该研究为医院感染防控提供了重要分子流行病学依据。

　　

在当代医疗环境中，耐万古霉素肠球菌(VRE)已成为全球公共卫生的重大威胁。这类细菌不仅对"最后防线"抗生素万古霉素产生耐药性，还能在医疗设备表面形成顽固的生物膜，导致导管相关感染和手术并发症。尤其令人担忧的是，屎肠球菌(Enterococcus faecium)已取代粪肠球菌成为医院感染的主要病原体，其在泰国医院的耐药率从2015年的7%飙升至2023年的14.5%。更棘手的是，无症状携带者可能成为"隐形炸弹"，通过医护人员的手部接触或污染的环境表面传播耐药菌株。

为应对这一挑战，清迈大学医学院临床微生物学系的研究团队开展了一项系统研究。研究人员收集了玛哈拉吉纳空清迈医院（1400张床位的三级医院）2023年5-8月期间的107株非重复VREfm分离株，包括43株临床样本（88.4%来自尿液）和64株监测样本（全部来自入院患者的直肠拭子）。通过整合表型检测与分子生物学技术，揭示了泰国北部地区VREfm的流行特征。

研究采用了多项关键技术：抗菌药物敏感性试验（AST）检测了7种抗生素的耐药谱；PCR技术筛查了vanA/B基因及4种毒力基因（esp、hyl、acm、sagA）；结晶紫染色法评估了生物膜形成能力；并对4株代表性菌株进行了全基因组测序（WGS），通过PubMLST、ResFinder和VFDB等数据库进行生物信息学分析。

研究结果部分呈现了丰富的数据发现：
3.1 细菌分布/人口统计学数据显示，74%以上感染者年龄超过60岁，印证老年群体是VRE感染的高危人群。
3.2 药敏结果显示所有分离株对氨苄西林、青霉素、环丙沙星、左氧氟沙星和万古霉素全部耐药，9.3%-14.6%存在高水平庆大霉素耐药(HLGR)，但均对利奈唑胺敏感。
3.3 基因检测发现所有菌株均携带vanA基因（未检出vanB），96.9%-100%携带esp、hyl等毒力基因。
3.4 生物膜实验表明83.7%临床株和68.7%监测株具有中度生物膜形成能力。
3.5 基因组分析鉴定出ST17和ST262两种序列型，均携带23种毒力基因和多重耐药基因，包括编码β-内酰胺酶、氨基糖苷修饰酶的基因以及完整的vanA基因簇。

讨论部分强调了三个关键发现：首先，临床与监测分离株在耐药性和毒力特征上的高度相似性，证实无症状携带者是医院传播的重要环节。其次，ST17作为全球流行的医院适应克隆，其检出印证了VREfm的跨区域传播风险。最后，毒力基因与生物膜形成的关联趋势（虽因样本限制未达统计学显著性）为理解VREfm的医院定植机制提供了线索。

这项研究的意义不仅在于揭示了泰国北部VREfm的分子特征，更通过WGS数据填补了东南亚地区该病原体的基因组信息空白。研究者特别指出，监测项目中常规开展直肠拭子筛查、结合vanA基因检测，对早期识别携带者至关重要。论文最后呼吁建立全国性监测网络，并将数据共享至国际数据库，以应对这场"看不见的微生物战争"。值得一提的是，研究团队在论文撰写中使用了ChatGPT进行语言优化，但强调所有结论均经过人工严格验证，体现了人工智能辅助科研的合理应用范式。