结构导向突变体揭示非白念珠菌Meyerozyma guilliermondii中分泌型天冬氨酸蛋白酶(Sap1972)的毒力机制

本研究通过构建结构导向的SAP1972基因缺失突变体，系统阐明了非白念珠菌Meyerozyma guilliermondii中分泌型天冬氨酸蛋白酶（Sap）的毒力作用机制。研究发现，该菌株最具保守性的毒力因子MgSap1972具有最大可成药活性裂隙（1122.652 ?2），其缺失导致生物膜质量减少38.8%，斑马鱼胚胎死亡率降低16.7%，且未出现脊柱后凸等亚致死终点。该研究建立了"计算机-体外-体内"联用技术平台，为抗真菌药物靶点发现提供了新思路。

　　

Highlight
系统解析非白念珠菌关键毒力因子

INTRODUCTION
念珠菌属（Candida）作为人体皮肤和肠道常驻菌群，可导致致死率≥70%的机会性感染。其中白念珠菌（C. albicans）通过网格蛋白介导的内吞作用和菌丝主动穿透机制入侵宿主细胞，并分泌多种毒力因子（VFs），特别是分泌型天冬氨酸蛋白酶（Sap）家族。

Phylogenetic analysis of MgSap
通过隐马尔可夫模型鉴定出9个胞外MgSap成员，与白念珠菌CaSap1-8等构建邻接进化树显示，这些蛋白酶分为两大进化枝：第一枝包含CaSap1-6和多数MgSap；第二枝则包含无毒力酵母蛋白酶、CaSap7及部分MgSap成员（4807_t等）。

Comparative modelling of MgSap
经N端信号肽修剪后，通过比较建模获得MgSap三维结构。最具病原相关性的MgSap1972具有最大可成药活性裂隙（1122.652 ?²），显著大于不可成药靶标MgSap4979（1323.165 ?²）。

Phylogenetic and sequence analyses of MgSap
进化分析揭示MgSap1972与致病性念珠菌Sap具有最高同源性，其活性裂隙特征提示其可能成为理想药物靶点。通过同源重组成功构建MgSAP1972缺失突变体（MgSOΔSAP1972）。

CONCLUSION
本研究证实MgSap1972在生物膜形成和宿主感染过程中发挥关键作用：突变体生物膜质量减少38.8%，斑马鱼胚胎死亡率降低16.7%，且未出现脊柱后凸等畸形。该工作为抗真菌药物开发提供了重要靶点线索。