综述：环状RNA：从非编码调控因子到功能性蛋白编码器

这篇综述系统阐述了环状RNA（circRNA）从发现历程到功能机制的研究进展，重点解析了其作为miRNA海绵、RNA结合蛋白（RBP）互作分子、转录调控因子的多功能性，并创新性探讨了通过IRES和m6A修饰介导的蛋白编码潜能。文章深度剖析了circRNA在肿瘤、神经退行性疾病和心血管疾病中的分子机制，同时前瞻性评述了其在基因编辑（如mitoBEs系统）、疫苗开发（如SARS-CoV-2 circRNA疫苗）和靶向治疗中的转化前景，为RNA医学领域提供了从基础到临床的全景视角。

环状RNA的分类与功能角色
环状RNA（circRNA）根据基因组来源和剪接机制可分为三类：外显子circRNA（EcircRNA）、内含子circRNA（ciRNA）和外显子-内含子circRNA（EIciRNA）。EcircRNA通过反向剪接形成，在细胞质中作为竞争性内源RNA（ceRNA）吸附miRNA，例如CDR1as/ciRS-7通过结合miR-7调控神经退行性疾病进程。ciRNA则滞留细胞核，通过结合RNA聚合酶II（Pol II）调控转录延伸，而EIciRNA通过保留内含子序列形成核内复合物，激活亲本基因表达。

合成与纯化技术突破
circRNA的体外合成主要依赖T4 RNA连接酶和核酶系统。T4 RNA连接酶2（T4Rnl2）对结构化RNA的环化效率显著，而I型内含子自剪接系统（如PIE方法）可实现无外源外显子的高纯度circRNA制备。纯化策略结合RNase R消化与高效液相色谱（HPLC），使circRNA纯度超90%。韩国公司Rznomics基于自剪接核酶技术开发的circRNA疗法RXRG001已获FDA临床试验批准。

递送系统的创新设计
脂质纳米颗粒（LNP）是circRNA递送的主力载体，经肺靶向修饰的LNP可增强肺癌免疫治疗效果。外泌体凭借天然穿透性成为理想载体，如circRNA mSCAR通过TPP-PDL电穿孔装载外泌体干预脓毒症。金纳米颗粒递送circDnmt1 siRNA显著抑制乳腺癌生长，而鼻内给药的LNP-circSCMH1在脑卒中模型中促进神经再生。

从调控因子到蛋白编码器
circRNA通过内部核糖体进入位点（IRES）或m⁶A修饰启动非帽依赖性翻译。circFGFR1p编码的肽段可抑制FGFR1致癌蛋白，而circ-EIF6翻译产物EIF6-224通过结合MYH9驱动三阴性乳腺癌进展。线粒体特异性circRNA mitoBEs系统实现了DNA的高精度编辑，为遗传病治疗提供新工具。

疾病关联与治疗应用
在肿瘤领域，circSMARCAS通过形成R-loop抑制SMARCA5全长蛋白表达，增强乳腺癌对顺铂敏感性。神经退行性疾病中，circ-SLC8A1在帕金森病模型中被氧化应激激活。心血管方面，circNCX1通过吸附miR-133a-3p上调CDIP1促心肌细胞凋亡。

临床转化挑战
尽管circRNA疫苗在动物模型中展现长效免疫原性（如抗Zika病毒单剂保护），但规模化生产、组织靶向性和免疫原性控制仍是瓶颈。新型载体如可降解阳离子脂质GSer-CARTs通过电荷调控实现高效递送，而circFAM53B编码的肿瘤新抗原为低突变负荷患者提供个性化疫苗策略。

未来展望
circRNA研究正从机制探索迈向临床转化，其稳定性和多功能性在基因治疗、疫苗开发和诊断标志物领域展现出独特优势。随着合成生物学与递送技术的协同创新，circRNA有望成为继mRNA之后核酸医学的又一里程碑。