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探究roscovitine(RSV)、血清饥饿(SS)及接触抑制(CI)对北虎猫皮肤成纤维细胞G0/G1期阻滞的影响及优化策略
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年08月01日 来源:In Vitro Cellular & Developmental Biology - Animal 1.5
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为优化野生猫科动物细胞核重编程技术,研究人员通过对比roscovitine(RSV)、血清饥饿(SS)和接触抑制(CI)三种方法,系统评估了北虎猫成纤维细胞G0/G1期阻滞效率。研究发现24小时SS处理能显著提高G0/G1期细胞比例,但伴随凋亡增加,为濒危物种体细胞重编程提供了关键实验依据。
这项研究深入探索了三种不同培养条件对北虎猫皮肤成纤维细胞G0/G1期细胞周期阻滞的影响。科研团队采用7.5和15μM两种浓度的roscovitine(RSV)分别处理24和48小时,设置24-96小时不等的血清饥饿(SS)组,以及24-72小时的接触抑制(CI)组,同时以50-60%汇合度的细胞作为对照。
通过显微镜观察和流式细胞术分析发现,随着浓度和处理时间增加,RSV会显著影响细胞存活率和形态,但未能有效提升G0/G1期细胞比例。CI处理对细胞质量和周期分布影响较小。最令人惊喜的是,24小时SS处理能显著增加G0/G1期细胞,不过这种处理方式会提高细胞凋亡水平。
研究最终确定24小时SS是北虎猫成纤维细胞G0/G1期阻滞的最优方案,为后续野生猫科动物的体细胞核移植和诱导多能干细胞研究奠定了重要基础。不过作者也指出,仍需进一步优化培养条件以降低SS引发的凋亡效应。
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