细胞可渗透荧光探针rit-BD的研发及其在DNA修复蛋白ALKBH2活体成像与功能抑制中的应用

本研究创新性地开发了基于HIV蛋白酶抑制剂利托那韦（ritonavir）的BODIPY标记荧光探针rit-BD，实现了对DNA修复关键酶ALKBH2的活细胞动态可视化（检测限115 ng/mL）与功能抑制双重作用。该探针具有576/586 nm特征吸收/发射峰，能特异性定位细胞核内ALKBH2，为癌症耐药性研究（如胶质母细胞瘤替莫唑胺耐药）提供了新型分子工具。

　　

【Highlight】
我们成功开发了一种新型细胞可渗透荧光探针rit-BD，该探针由ALKBH2抑制剂利托那韦（ritonavir）与荧光团BODIPY化学偶联而成。研究证实rit-BD能特异性结合ALKBH2催化口袋，其结合亲和力与原始利托那韦相当，为活细胞中ALKBH2的动态监测提供了革命性工具。

【有机合成】
在干燥的5 mL圆底烧瓶中，将脱硫唑甲氧羰基利托那韦（2 mg, 0.0035 mmol）与BODIPY 576/589琥珀酰亚胺酯（1.47 mg, 0.0035 mmol）溶于无水乙腈（0.5 mL），加入二异丙基乙胺（1.8 μL）后在惰性气氛下室温反应14小时。通过TLC监测显示原料完全转化。

【光谱特性】
rit-BD展现典型光学特征：最大吸收波长（A_max）575 nm，最大发射波长（E_max）585 nm，斯托克斯位移仅10 nm（图1B）。经精密测定，其实际峰值吸收/发射分别为576 nm和586 nm，这种近红外特性使其特别适合生物成像应用。

【结论】
rit-BD作为首个ALKBH2靶向荧光探针，不仅能通过显微成像实时追踪核内ALKBH2分布（图3），其抑制常数（K_i）更达到微摩尔水平。这种"看得见又治得了"的双功能特性，为癌症靶向治疗提供了全新策略——好比给DNA修复系统装了"GPS追踪器+制动装置"。