热中性环境与时间疗法协同增效PD-1阻断剂攻克黑色素瘤耐药性

本研究针对免疫检查点抑制剂(ICI)临床耐药难题，创新性地通过热中性环境(30°C)与昼夜节律给药(ZT4)双干预策略，在B16-F10黑色素瘤模型中实现30%完全缓解率和长期生存。该研究揭示了宿主生理状态对免疫治疗的关键调控作用，为临床转化提供简单安全的增效方案。

　　

免疫治疗被誉为肿瘤治疗的革命性突破，但现实中多数患者面临原发性或获得性耐药的困境。即使在响应率较高的黑色素瘤中，完全缓解率仍不足20%，而胰腺癌等"冷肿瘤"更是几乎无响应。传统研究多聚焦于肿瘤微环境(TME)特性，却忽略了实验室标准饲养条件可能造成的系统性免疫抑制——小鼠在22°C标准温度下持续承受冷应激，而随意安排的给药时间可能错过免疫活性高峰。

加拿大圭尔夫大学(University of Guelph)生物医学系的Justin Tang、John P. Miller和Raymond Yang团队开展了一项突破性研究。他们设计六组对照实验，系统分析热中性环境(30°C)和时间疗法(ZT4给药)单独及联合应用对B16-F10黑色素瘤模型的影响，通过肿瘤体积监测、生存分析、基因表达谱和血清细胞因子检测等系列实验，发现双干预策略产生惊人协同效应。相关成果发表在《Biomedicine》期刊。

研究采用多组学技术联用策略：建立六组随机对照动物模型(含严格车辆对照)，通过精确环境温控系统维持22°C/30°C恒温；采用程序化注射泵确保ZT4/ZT22精准给药；运用qRT-PCR检测TME关键基因表达；结合Luminex多重检测系统量化血清IFN-γ水平；并通过肿瘤再攻击实验验证免疫记忆形成。

6.1 双干预协同抑制肿瘤生长
数据显示，常规治疗组(22°C+ZT22)仅延缓肿瘤进展，而30°C+ZT4联合组在第12天肿瘤体积减少95.5%，显著优于单干预组。热中性环境单独使用可使肿瘤生长减缓31.7%，证实环境温度本身具有免疫调节作用。

6.2 显著提高完全缓解率
生存分析显示，双干预组30%小鼠获得完全缓解(CR)并存活60天，而单干预组仅10%。所有CR小鼠均建立持久免疫记忆，在二次攻击实验中100%抵抗新肿瘤形成。

6.3 机制独立于药代动力学
药代实验证实30°C不改变抗PD-1抗体清除率，排除了药物暴露量影响的可能。

6.4 TME重编程是关键
基因分析显示双干预组CD8⁺T细胞标志物Cd8a表达增加3.7倍，细胞毒性效应分子Gzmb和Prf1上调超6倍，IFN-γ激增9.3倍。同时免疫抑制因子Arg1表达降低48%，形成高度炎症性TME。血清IFN-γ水平2.7倍于对照组，印证系统性免疫激活。

这项研究颠覆性地证明，通过调节宿主生理状态这种简单安全的方式，可使"冷肿瘤"转化为对标准治疗敏感的"热肿瘤"。其临床转化潜力巨大：加热毯和早晨给药都是医院现成可实施的方案。研究同时呼吁重审视 preclinical研究标准，避免因不当饲养条件掩盖药物真实潜力。该成果为提升现有免疫疗法效益提供了极具操作性的解决方案，可能改变未来肿瘤治疗格局。