草甘膦与农达对支持细胞增殖影响的机制研究及其对雄性生殖健康的潜在威胁

本研究通过体内外实验揭示：农达(R)含草甘膦(G)的除草剂配方可抑制幼鼠支持细胞(SC)的FSH刺激增殖（体外实验显示BrdU掺入减少），但G单独作用无显著影响。值得注意的是，新生期（PND3-7）R暴露（50 mg/kg）未改变SC增殖标志物，成年后每日精子产量(DSP)亦保持正常。该发现为评估除草剂生殖毒性提供了关键实验证据。

　　

Highlight
近期我们发现G和R在体内外均可破坏血睾屏障(BTB)完整性（Gorga等2020,2021），但其对支持细胞(SC)增殖的影响尚不明确。本研究首次系统评估了除草剂对SC增殖期（决定成年精子产量的关键窗口）的作用机制。

Materials
实验材料来自Sigma-Aldrich（美国圣路易斯），包括组织培养基、草甘膦标准品。所用农达配方为Roundup Full II（孟山都阿根廷公司）。促卵泡激素(oFSH-S-16)由美国国立糖尿病、消化和肾脏疾病研究所(NIDDK)提供。

Sertoli cell isolation and culture
取8日龄SD大鼠睾丸分离支持细胞（方法见Riera等2012），将其接种于6/24/96孔板或8腔室载玻片（5 μg DNA/cm²）。该发育阶段的SC具有活跃增殖能力，是研究生殖毒理的理想模型。

Effect of G and R on Sertoli cell proliferation in vitro
在8日龄SC培养体系中，我们采用台盼蓝排除法评估细胞活性。结果显示：暴露于10-1000 ppm（0.01-1 g/L）R 24小时后，FSH刺激的BrdU掺入量显著降低（p<0.05），而同等浓度G处理组未见异常。有趣的是，该效应仅出现在R处理组，提示配方中的助剂可能起关键作用。

Discussion
全球男性精液质量持续下降（Carlsen等1992,Levine等2017），环境毒素暴露是潜在诱因。本研究首次证实：虽然R在体外抑制SC增殖，但新生期暴露（50 mg/kg）未影响PND3-7大鼠的BrdU标记指数，成年DSP亦无变化。这提示商业除草剂对SC增殖的直接影响可能被体内代偿机制抵消，但其长期生殖风险仍需警惕。