综述：细胞外颗粒酶B在角膜和结膜疾病中的潜在作用：一篇叙述性综述

这篇综述深入探讨了丝氨酸蛋白酶颗粒酶B（GrB）在角膜和结膜疾病中的新兴作用，系统梳理了其通过细胞外活性介导的病理机制，包括炎症失调、基底膜破坏、上皮-间质转化（EMT）、纤维化及新生血管形成等。作者团队整合了眼部与全身疾病的研究证据，提出GrB可能成为治疗眼表疾病（如干眼症、翼状胬肉、Stevens-Johnson综合征等）的新靶点，并强调了其在衰老和紫外线（UV）暴露相关病变中的潜在贡献。

　　

引言

角膜和结膜作为眼表的核心结构，其炎症性疾病是全球视力障碍的主要诱因。颗粒酶B（Granzyme B, GrB）作为免疫系统中的丝氨酸蛋白酶，传统认知中通过穿孔素依赖途径诱导靶细胞凋亡。然而，近年研究发现其细胞外活性可切割多种底物，参与组织重塑、屏障功能障碍等病理过程，成为眼表疾病研究的新焦点。

颗粒酶B的多维角色

2.1 丝氨酸蛋白酶与颗粒酶家族
GrB属于丝氨酸蛋白酶超家族，其活性中心含关键丝氨酸残基。人类基因组中已鉴定出5种颗粒酶（GrA、GrB、GrH、GrK、GrM），其中GrB因高效的底物切割能力被广泛研究。

2.2 细胞内功能：免疫监视的“执行者”
在细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）和自然杀伤（NK）细胞中，GrB通过穿孔素介导的 caspase 依赖/非依赖途径清除病毒感染或肿瘤细胞，发挥免疫防御核心作用。

2.3 细胞外功能：疾病进程的“推手”
当GrB释放至细胞外空间，缺乏内源性抑制剂的特性使其可切割细胞外基质（ECM）蛋白（如纤维连接蛋白、层粘连蛋白）、细胞黏附分子（如E-钙黏蛋白）及细胞因子前体（如pro-IL-1α），导致四大病理效应：

1. 炎症放大：通过激活IL-1α/IL-18及PAR-2受体，驱动慢性炎症；
2. 屏障破坏：降解α6β4整合素、胶原XVII等基底膜锚定蛋白，诱发上皮脱落；
3. 纤维化：切割饰胶蛋白聚糖（decorin）释放TGF-β1，促进肌成纤维细胞转化；
4. 血管新生：分解血小板反应蛋白-1（TSP-1）解除其抗血管生成抑制。

眼表疾病中的GrB证据

3.1 临床关联性

• 翼状胬肉：患者病变组织中GrB⁺肥大细胞密度显著增加，且与UV暴露呈正相关；
• 角膜移植排斥：穿透性角膜移植术（PK）后GrB mRNA表达激增，伴随更强的新生血管反应；
• Stevens-Johnson综合征：患者泪液中GrB与穿孔素水平升高，提示其参与黏膜屏障崩解。

3.2 分子机制解析

• ECM重塑：GrB切割角膜基质中的饰胶蛋白聚糖，释放的TGF-β1驱动角膜细胞向肌成纤维细胞转分化；
• EMT促进：在翼状胬肉中，GrB通过降解E-钙黏蛋白，激活Snail信号通路，加速上皮细胞迁移侵袭；
• 内皮失巢凋亡：Fuchs内皮营养不良患者的角膜内皮细胞分泌GrB，可能通过层粘连蛋白-511降解诱发细胞脱落。

治疗潜力与挑战

尽管GrB抑制剂（如VTI-1002）在湿性年龄相关性黄斑变性（nAMD）模型中已显示抗血管生成效果，但眼表疾病的应用仍需解决两大问题：

1. 组织特异性递送：如何精准靶向角膜/结膜病变区域；
2. 动态平衡维护：避免干扰GrB在免疫监视中的生理功能。

未来方向

建议通过类器官模型模拟眼表微环境，结合单细胞测序技术解析GrB的细胞来源异质性，并开发局部缓释制剂以评估其临床转化价值。