重组牡蛎热休克蛋白70修饰磁珠高效富集食品基质中的人诺如病毒

本研究开发了一种基于重组牡蛎热休克蛋白70修饰磁珠(roHSP70-MBs)的新型富集技术，可显著提高食品基质中低浓度人诺如病毒(HuNoV)的检测灵敏度。相比传统方法(PGM-MBs和PEG沉淀)，该技术将检测限降低至1-18 copies/mL，在草莓、生菜和牡蛎中的回收率提升至31-78%，且无需商业RNA提取试剂盒，为食源性病毒监测提供了快速(约2小时)、稳定(56天保持70%效率)的解决方案。

　　

Highlight亮点
本研究创新性地利用重组牡蛎热休克蛋白70(roHSP70)修饰磁珠建立高效富集系统，突破传统方法在灵敏度(10倍优于PGM-MBs)、回收率(草莓37%/生菜78%)和稳定性(56天保持70%活性)方面的局限，为复杂食品基质中低载量人诺如病毒的快速检测提供全新解决方案。

Methods方法
临床样本制备
所有临床样本均在上海交通大学医学院附属上海儿童医院临床检验科采集，经伦理委员会批准(2024R139-E02)。样本在生物安全柜中处理，用PBS缓冲液稀释至1:10(v/v)悬液备用。

磁珠最佳富集条件
通过系统评估蛋白包被浓度(100μg/mL roHSP70)、磁珠-样本体积比(1:10)和孵育时间(45分钟@37°C)等参数，建立最优富集体系。与猪胃粘蛋白磁珠(PGM-MBs)相比，roHSP70-MBs对6种基因型(GI.3/GII.2等)均表现出更广谱的结合能力。

Discussion讨论
食品基质中低病毒载量(<10³ copies/g)和核酸抑制物是HuNoV检测的主要瓶颈。本研究开发的roHSP70-MBs系统通过特异性捕获病毒衣壳，结合热裂解释放RNA的创新流程，不仅将总处理时间压缩至2小时，还规避了商业RNA提取试剂盒的需求，显著提升检测通量。

Conclusion结论
该roHSP70-MBs系统展现出三大优势：1)超敏检测限(1-18 copies/mL)；2)卓越的基质适应性(草莓/生菜/牡蛎)；3)优异的操作稳定性(4°C保存56天)。这种将高效富集与简化流程相结合的策略，为食源性病毒监测提供了突破性技术平台。